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神経細胞の新しい分化マーカーとしての糖脂質の同定

鉴定糖脂作为神经元分化的新标志物

基本信息

批准号：
06680598
负责人：
田井直
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

神経細胞における糖脂質の特異的発現を検索するために、ラット小脳(生下時)由来の初代培養細胞を我々が開発した一連の抗糖脂質特異モノクローナル抗体を用いて解析した。ニューロンでは顆粒細胞が抗GD1b抗体と強く、抗GD3抗体と弱く反応したが、その他の抗体とはまったく反応しなかった。この抗GD1b抗体の反応性はシアリダーゼ処理により消失した。しかし、シアリダーゼ処理細胞は、抗GM1抗体と強く反応した。顆粒細胞はコレラ毒素(GM1結合蛋白質)やテタヌス毒素(GT1b結合蛋白質)とも強く反応した。上記結果は顆粒細胞に発現される主要なガングリオシドはGD1bであることを示唆した。従来、ニューロン特異ガングリオシドとしてコレラ毒素やポリクローナル抗体を用いた研究によりGM1が報告されてきたが、我々の結果はまったく異なる。ある種の小型神経細胞は抗GD2抗体と強く反応したが、コレラ毒素やテタヌス毒素とも強く反応した。この神経細胞は未同定であり今後の検討を要する。プルキンエ細胞は抗O-Ac-ジシアロガングリオシド抗体と強く反応したが、その他の抗体とはまったく反応しなかった。この細胞をアンモニア蒸気で処理すると反応性が消失すること、およびシアリダーゼ消化後の糖鎖の骨格がnLc4Cerであること等より、このガングリオシドはO-Ac-DL1と結論された。グリアではアストロサイトにGM4,GD3,Gb4Cer,Gb5Cerが、オリゴデンドロサイトにGalCer,SM4sが特異的に発現されていることが判明した。さらに、これら細胞は、各々、抗GFAP抗体と抗MBP抗体と特異的に反応することを免疫二重染色法にて確認した。GalCerはオリゴデンドロサイトのマーカーとして広く利用されているので、上記結果は、各糖脂質は神経細胞の有用な分化マーカーになる可能性を示す。

The detection of glycolipid-specific expression in neuronal cells and the analysis of anti-glycolipid-specific antibodies from primary cultured cells (at birth). Granular cells contain anti-GD-1b antibodies, anti-GD-3 antibodies, and anti-GD-3 antibodies. The anti-GD-1b antibody was found to be resistant to the disease. Anti-GM1 antibodies are strongly anti-GM1. Granular cells contain both GM1-bound and GT-1b-bound toxins. The above results show that granular cells are mainly found in GD1b. The results of GM1 and GM2 studies were different. The small neurons of the species react strongly to GD-2 antibodies, and the small neurons react strongly to GD-2 toxins. The brain cells are not stable, and future research is needed. Antibodies against O-Ac-1 are highly reactive and anti-O-Ac-1 antibodies are highly reactive. The results showed that the protein content of the protein was higher than that of the protein content of the protein. GM4,GD3,Gb4Cer,Gb5Cer, GalCer,SM4s are unique in their discovery. The anti-GFAP antibody and the anti-MBP antibody were confirmed by double immunostaining. The above results show the possibility of useful differentiation of each glycolipid cell.