权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

精製オピオイド結合物質(受容体)のリポソーム膜への再構成とその性格付け

纯化的阿片结合物质（受体）在脂质体膜中的重构及其表征

基本信息

批准号：
62214017
负责人：
藤岡聡之
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Mukogawa Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

現在全く不明の, オピオイド受容体系でのトランスメンブレンコントロールの解明を目指し, エンケファリン類と親和性基とするアフィニティクロマトグラフィー法を用いて, オピオイドー結合物質(受容体)を精製し, 更に精製受容体を抑制性GTP結合タンパク質(Gi)と共にリポソーム膜に再構成し, そのアゴニスト結合能について検討を加え, 以下の結果を得た.1.アフィニティHPLCを用いた受容体の精製(Peptide Chemistry):Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leuを受容体に対する親和性基としたアフィニティHPLC用ゲルを開発した. このゲルを用いて, ラット脳より界面活性剤にて可溶化した受容体粗分画からオピオイド結合能を有する部分精製標品を得た. 電気泳動的による分析では, 数本のバンドが観測されたため, 更に本標品をサイズ排除HPLCにて精製し, 電気泳動的に単一な, 分子量62,000のバンドを得た.2.精製受容体のリポソーム膜への再構成(生化学;投稿準備中):精製受容体を精製Giの存在下, または非存在下にリポソーム膜に再構成し, S-アゴニストとして知られる^3H-DADLEをラジオリガンドとして用いたラジオレセプターアッセイにより, リガンド結合能を測定した. その結果, 精製受容体をGiの存在下でリポソーム膜に再構成した場合には, 高親和性と低親和性の二相性の応答が見られたが, Gi非存在下では低親和性の応答のみが観測された. 更に, Giと連関した受容体系で一般に見られるように, Gi共存下での再構成系において観測される高親和性の成分が, グアニンヌクレオチド類の添加によって低親和性へ移行することも確認された. 本実験の結果より, 我々の用いた精製標品が単なるオピオイド結合物質ではなく, オピオイド受容体そのものであり, しかも得られた受容体は, S-タイプであることが明らかとなった. また細胞膜中と同様に, S-タイプのオピオイド受容体がGiと連関し得ることを精製受容体を用いて初めて示した.

Now that you don't know what to do, you can tell the target, the type and the nature of the target, the type and the property of the capacitor system. In order to improve the capacity of the receptor, the combination of the receptor inhibitory GTP and the receptor inhibitor (Gi) was used to reconstruct the membrane of the receptor. The results show that. 1. You need to use the Peptide Chemistry for your HPLC: you can use the HPLC for your HPLC. You can use the HPLC for this purpose. In this paper, we use the device, the interface activity, the solubility of the capacitor, the rough separation of the capacitor and the combination of some of the fine products. The molecular weight of the electrophoretic assay is 62000. The molecular weight of the electrophoretic assay is 62000, and the molecular weight of the electrophoretic assay is 62000. (biochemistry; contribution preparation): in the presence of sperm Gi, the membrane is reconstructed in the presence of a non-existent device, and that is known to be true in the presence of a non-existent device. In this case, it can be determined by the combination of the device and the device. The results showed that the membrane of the sperm receptor in the presence of Gi was reformed into a combination of high and low sex and biphasic sex, while the presence of Gi in the non-presence of the receptor showed that the membrane of the receptor was not in the presence of the receptor, the membrane of the sperm receptor, the membrane of the receptor, the membrane of the receptor, the high and the low, the biphasic and the non-existent of Gi. In addition, the Gi connection tolerance system is generally characterized by high and low levels, while the coexistence of Gi makes it possible to re-form the system in terms of high levels and sexual components. In the results of this experiment, we use the combination of the standard product, the standard product, the product, the receiver, the recipient, the recipient, the receiver, the recipient, the recipient, the recipient, There is no difference between the two groups in the membrane of the cell. The capacitor is linked to the receptive Gi, and the capacitor is shown as the primary one.