Characterization of enkephalin-containing neurons in the spinal dorsal horn visualized by expression of green fluorescent protein in BAC transgenic mice

通过 BAC 转基因小鼠绿色荧光蛋白表达可视化脊髓背角中含脑啡肽神经元的表征

• 批准号: 23500468
• 负责人: HORI Yuuichi
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23500468/
• 关键词: エンケファリン; NMDA受容体; BKチャネル; 脊髄痛覚神経回路; 脊髄後角表層ニューロン; 単一細胞遺伝子発現解析; パッチクランプ記録; 興奮性シナプス後電流; NMDA受容体サブユニット; セロトニン受容体; パッチクランプ記録法

Using a bacterial artificial chromosome, we have generated a transgenic mouse which expresses GFP under the control of the preproenkephalin promoter. We observed as follows: 1) double immunostaining analysis using anti-enkephalin and anti-GFP antibodies showed that all GFP (+) neurons contained enkephalin; 2) forskolin increased the number of GFP (+) neurons in the superficial dorsal horn; 3) the partial ligation of unilateral sciatic nerve induced allodynia and increased the number of GFP (+) neurons in the ipsilateral side; and (4) Single-cell Real-time RT-PCR analysis showed that several GFP (+) neurons in the superficial dorsal horn expressed NMDA receptor subunits NR1, NR2A and NR2B mRNA and BK channel mRNA. The expression patterns of these genes were not significantly different between GFP (+) and (-) neurons. The Enk-GFP mouse is a useful model to study the cellular mechanisms underlying the synaptic transmission of nociceptive information in the central nervous system.

使用细菌人工染色体，我们已经产生了一个转基因小鼠表达GFP的前脑啡肽原启动子的控制下。我们观察到以下情况：结果：1）脑啡肽和GFP抗体双染色显示，GFP（+）神经元均含有脑啡肽，2）Forskolin可增加背角浅层GFP（+）神经元的数量，3）单侧坐骨神经部分结扎引起异常性疼痛，并增加同侧GFP（+）神经元的数量;（4）单细胞Real-time RT-PCR分析显示，背角浅层部分GFP阳性神经元表达NMDA受体亚单位NR 1、NR 2A和NR 2B mRNA及BK通道mRNA。这些基因的表达模式在GFP（+）和（-）神经元之间没有显著差异。Enk-GFP小鼠是研究中枢神经系统中伤害性信息突触传递的细胞机制的有用模型。

项目成果

Visualization of serotonergic neurons in the Nucleus Raphe Magnus using BAC transgenic mice

使用 BAC 转基因小鼠观察中缝马格努斯核中的血清素能神经元

• 发表时间: 2012
• 作者: Fukushima T;Yuge K;Hori Y
• 通讯作者: Hori Y

神経因性疼痛行動とセリンラセマーゼの脊髄における分布

神经性疼痛行为和丝氨酸消旋酶在脊髓中的分布

• 发表时间: 2012
• 作者: 弓削和哉;福島央之;田中志歩;金野柳一;堀 雄一
• 通讯作者: 堀 雄一

Intrathecal administration of botulinum toxin A : Antiallodynic action and inhibition of excitatory synaptic transmission in the spinal dorsal horn

鞘内注射 A 型肉毒杆菌毒素：抗痛觉作用和抑制脊髓背角的兴奋性突触传递

• 发表时间: 2012
• 作者: Nemoto K;Yamaguchi S;Matsuzawa T;Takasusuki T;Terashima T;Fukushima T;Ohtsubo T;Hori Y
• 通讯作者: Hori Y

The effects of HPC1/Syntaxin 1A gene knockout on the general anesthetic actions of sevoflurane

HPC1/Syntaxin 1A基因敲除对七氟烷全身麻醉作用的影响

• 发表时间: 2012
• 作者: Kokubu S;Matsuzawa R;Nemoto K;Fukushima T;Yamaguchi S;Maekawa M;Fujiwara T;Akagawa K;Hori Y
• 通讯作者: Hori Y

Differential effects of peripheral nerve injury on serotonergic and non-serotonergic neurons in mouse periaqueductal gray matter

周围神经损伤对小鼠导水管周围灰质中血清素能和非血清素能神经元的不同影响

• 发表时间: 2011
• 作者: Shirakawa K;Yamaguchi S;Kokubu S;Takasusuki M;Maekawa M;Kitajima T;Hori Y
• 通讯作者: Hori Y