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ムギネ酸合成分泌の遺伝的制御によるFe欠乏耐性植物の創作

通过基因控制麦根酸合成和分泌创造耐缺铁植物

基本信息

批准号：
62303014
负责人：
森敏
金额：
$ 8.38万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Co-operative Research (A)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1989
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62303014/
关键词：
鉄欠乏ニコチアナミン二次元電気泳動 S-アデノシルメチオニンムギネ酸メチオニンデオキシムギネ酸ハイドロキシムギネ酸ニコチアナミンCDNAライブラリー Fe(OH)_3ゲル Fe欠乏耐性ムギネ酸類遺伝子導入ムギネ酸分解菌日周性 Fe溶解力

项目摘要

ムギネ酸関連遺伝子のクロ-ニングのために以下のことを行なった。1.ムギネ酸合成系路を確定した。メチオニン→SAM(S-adens Sylmethiorune)→ニコチアナミン(NA)<-NH_2>___→Keto体<+OH>___→2'-deoxymugineic acid(DMA)という一連の経路を得た、結局Xチオニン3分子が縮合してDMAとなることを、in vitro系によって証明した。この際生じるKeto体と思われる中間差物は合成物がないので未同定である。次にDMA<+OH>___→MA(ムギネ酸)<+OH>___→epiHMA又はHMAと考えられるがこの反応のin Vitro 系には成功していない。今後はは今回の実験でアッセイ系が確立した。SAM→NAの合成酵素を純粋に單離し、このペプチドのN末端のシ-ケンスからムギネ酸合成関連の遺伝子群をクロ-ニングすることをねらっている。2.鉄欠乏関連遺伝子のクロ-ニング。未だムギネ酸関連遺伝子が何一つ單離されていないために、デファレンシャルハイブリダイゼ-ション法(Df法)により、鉄欠乏関連遺伝子をクロ-ン化した。すなわち、鉄欠乏大麦根のmRNAからcDNAライブラリ-を作成し、このライブラリ-から-Fe CDNAと+FeCDNAの差をとって、7つのFe欠乏に特異的に発現するクロ-ンを單離した。このDNAシ-ケンスと機能については今後の課題である。3.Fe欠乏特異蛋白の單離。Fe欠乏と対照区の大麦根から蛋白を抽出しこの二次元電気泳動上のスポットから、数コのFe欠乏に特異的に誘導されるペプチドを検出した。しかしこれらのペプチドのN末端はことごとくブロックされていた。現在ブロックされたペプチドのN末端分析法を検討している。

Please contact me. Please contact me. Please contact me. 1. Make sure that the acid synthesis system is safe. We need SAM (S-adens Sylmethiorune) and lt;-NH_2>___ keto (lt;+OH>___) 2'-deoxymugineic acid (DMA). We need to know how to get the best results. The results show that there are three molecules in the system, that is, DMA. The difference between the products and the compound in the Keto system is not the same as that in the system. The second DMA<+OH>___ MA (acid acid) & lt;+OH>___ epiHMA also has a HMA test. The in Vitro system is successful. In the future, I would like to make sure that I am going to make sure that I am going to make a decision this time around. SAM'NA 'synthetic enzymes isolated, isolated, two。 You don't have enough money to link to your child. If you are not using the Df method, you may need to know if you are not in need of contact. Barley root mRNA, barley root cDNA, barley root, barley root, barley The DNA engine will be able to help you in the future. 3.Fe lacks specific protein isolates. Fe is deficient in light area. Barley root protein is extracted. Secondary electrophoretic activity is used in secondary electrophoretic swimming. There is a lack of energy in Fe. There is a lack of special guidance in this area. I don't know. I don't know what's going on. Now, we need to know about the N-terminal analysis method.