腸管系病原性大腸菌染色体DNAの分子遺伝学的特性の解析

肠道致病性大肠杆菌染色体DNA分子遗传特征分析

• 批准号: 62570186
• 负责人: 笹川 千尋
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62570186/
• 关键词: 病原性大腸菌; 赤痢菌; IS; ISI; 組換えDNA

腸管系病原性大腸菌は病原性により4群(ETEC, EPEC, EIEC, EHEC)に大別されているが, 後ろ群の病原性因子の実体は不明で医学細菌学上重要な問題となっている. ところで大腸菌と赤痢菌は最も近緑な関係にあるがEHECや一部のEPECでは志賀様毒素の産生性, EIECは細胞侵入性において各々共通性を示す. しかしその病原性の本体は不明で, 複数の因子が関与し病原性を発現しているものと推定されている. したがって腸管系病原性大腸菌各群の生物学的特徴, 具体的には染色体DNAの遺伝構築, を分子レベルで明らかにできればそれは病原因子を理解する上に1つの手掛りになると考えられる. そこで本研究は菌染色体の分子遺伝学的特徴の1つとしてISIの分布を調べ, EIEC-EPEC-EHEC-shigellaeの類緑関係を明らかにすることを目的とした. 具体的には(1)EIEC, EPEC, EHEC, 赤痢属各血清群に属する菌を多数集収しそれらの染色体DNAを分離精製し, (2)EcoRIで完全切断後アガロース電気泳動にて分離し, (3)ISIDNAをプローブにしサザン法にてISIを含むEcoRI断片の数を調べた. 以上の方法にて73株についてISIの分布を調べた結果, EIEC(26株)はすべて25コピー以上のISIを有し, それは赤痢菌のそれと著るしい類似性を示した. EPEC(15株)は0〜11コピーとISIの分布は様々であった. EHEC(7株)は同一サイズのEcoRI断片上に唯一のISIが存在していた. さらに3種の異なる血清型に属するEIECのISIを単離しその全塩基配列を決定し, 既報の赤痢菌の4種のISIと比較した. 029と0136のISIは互いに同一でその塩基配列はB群赤痢菌のISI(ISIF)と, 又02412D群赤痢菌のISI(ISIS)と各々酷似していた. これらの結果は, EIECが他の2つの病原性大腸菌とは異なり, むしろ赤痢菌と同一の遺伝学的背景を備えていることを示唆している.

The pathogenic factors of intestinal pathogenic coliform groups (ETEC, EPEC, EIEC, EHEC) are unknown and important in medical bacteriology. EHEC and EPEC are part of the Shiga toxin production process, and EIEC is part of the cellular invasion process. The nature of pathogenicity is unknown, and multiple factors are involved in pathogenicity development. The biological characteristics of each group of pathogenic coliform bacteria in intestinal tract, specific chromosome DNA genetic architecture, molecular structure, understanding of pathogenic factors, etc. In this study, the molecular genetic characteristics of bacterial chromosomes and ISI distribution were investigated, and the relationship between EIEC-EPEC-EHEC-shigellae was clarified. Specifically,(1)EIEC, EPEC, EHEC, and most of the bacteria belonging to each serogroup of genus Erythrum were collected and their chromosomal DNA was isolated and purified;(2)EcoRI was completely cut off and then isolated by electrophoresis;(3) ISI DNA was isolated and the number of EcoRI fragments was regulated by ISI method. The ISI distribution of 73 strains was adjusted according to the above methods. The ISI distribution of EIEC(26 strains) was higher than 25 ℃, and the similarity of EIEC(26 strains) was higher than 25 ℃. EPEC(15 plants) 0 ~ 11 ISI EHEC(7 strains) is the only ISI on the same EcoRI fragment. The ISI of three different serotypes of EIEC was determined by comparison of ISI of four reported species of Salmonella. 029 0136 ISI The results show that EIEC has two different pathogenic E. coli strains and two different pathogenic E. coli strains.

项目成果

Yutsudo et al.: FEMS Microbiology Letters. 48. 273-276 (1987)

Yutsudo 等人：FEMS 微生物学快报。

Sakai Et al.: Molecular Microbiology.

Sakai 等人：分子微生物学。