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赤痢菌ヘテロIII型分泌系を用いたクラミジア病原因子のプロテオーム解析

使用志贺氏菌异型 III 分泌系统对衣原体毒力因子进行蛋白质组分析

基本信息

批准号：
18780229
负责人：
大屋賢司
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

オウム病クラミジアChlamydophila psittaci菌体の2次元電気泳動で展開したスポットの解析においては,C.psittaciの全ゲノム配列が未解読であるため,既読他種クラミジアデータベースを利用せざるを得なかった。そこで,より効率的にプロテオーム解析を進める目的で,ヒトへの集団感染時に分離されたC.psittaci Mat116株の全塩基配列決定を試みた。得られたMat116株ゲノムドラフト配列を元にギャップクローズを行い,暫定全塩基配列を得た。他種クラミジア全塩基配列との比較により,C.psittaciに固有と思われる配列が示唆された。また,ネコクラミジアC.felis新規抗原CF0218の性状解析を行った。CF0218は動物由来クラミジア特有のtransmembrane head(TMH)領域にコードされ,特徴的な二峰性の疎水性モチーフを有していた。TMH蛋白質は疎水モチーフの存在から,クラミジアの封入体構成蛋白質Incファミリーに属すると推察されている。Incの幾つかは,クラミジアのIII型分泌機構(TTSS)により分泌されることが知られているため,CF0218についても検討を行った。赤痢菌にCF0218全長を導入し,培養上清へのTTSS依存的な分泌を検討したが,CF0218全長はクラミジア菌体内で不安定であった。赤痢菌体内での安定発現を目的にCF0218のC末端を除去した各種コンストラクトを作成し,引き続きTTSS依存的な分泌を検討している。CF0218については,感染特異的診断用抗原として使用可能な新規TMH蛋白質であることが明らかとなり論文投稿中である。現在は,得られたゲノム情報,プロテオーム解析を組み合わせTTSSエフェクターを初めとしたクラミジア病原因子の網羅的な解析を進めている。

C.psittaci has been fully assigned to the 2D electrokinetic analysis of Chlamydophila psittaci cells. For this purpose, the total gene alignment of C.psittaci Mat116 strains was determined when isolated from the infected population. Mat116 was selected for the first time. C.psittaci is an inherent component of the structure. C.felis new antigen CF0218 was analyzed. CF0218 has a unique transmembrane head(TMH) field for animal origin, and a characteristic bi-peak water resistance. TMH protein is a member of the protein family of the Encapsulate Protein Inc. Inc., CF0218, Type III Secretory Mechanism (TTSS), CF0218, CF0218. CF0218 full-length bacteria introduced, culture supernatant TTSS-dependent secretion of the study, CF0218 full-length bacteria in vivo instability. For the purpose of stable development in Salmonella, the C-terminal of CF0218 was removed and various protein components were prepared, and TTSS-dependent secretion was discussed. CF0218, infection-specific diagnostic antigen Now, get the information, select the group analysis, select the TTSS, select the group analysis, select the group analysis.