各種フェリチンに対するモノクロ-ナル抗体使用によるフェリチン抗原決定基の研究

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昭和62年、63年の2年間にわたる研究成績から特筆されるものに乏しい感をもった。そこで平成元年度はHeLa細胞フェリチンに対するモノクロ-ナル抗体(MoAb)の作製を開始した。HeLa細胞フェリチン、(HeLa.F)に対するMoAbを産生するHybridamaについて、正常ヒト肝フェリチン(HLF)、正常ヒト心臓フェリチン(HHF)、正常ヒト脾フェリチン(Hsp.F)、HeLa.Fを用いてELISA法でassayを試み、HeLa.Fに特異的に反応する抗体を産生するものを得た。同hybridomaのクロ-ニングにより、9種類のHybridamaを得た。それらのうち、HeLa.Fとよく反応し、HLF、Hsp.F、HHFとは余り反応しない3種類のHybridomaの産生するMoAbについてその性状を検討した。それらをそれぞれMoAb04225、04229、04231と名付けた。免疫化学組織染色法で肝癌組織と正常肝組織をABC法で染色したところ、MoAbの400倍希釈で04231のみが肝細胞組織のみを染め分けることができた。そこで04225、04229、04231のMoAbについて阻止試験を試みたところ、04231はその10倍の抗体濃度、すなわち10moDの04231で88%阻止されたのに対して、04231と04225は同じ濃度で70%の阻止率、04231と04229は同じ濃度で3%の阻止率を示した。即ち、MoAb04231は04225、04229とは明らかにことなるHeLa.Fのエピト-プを認識することを窮わせる成績であった。現在それらフェリチンを用い、これらMoAbを使用してペプタイドマップの違いについて検討している。さらにMoAbによる血清フェリチンのAssay系の確立、MoAbを用い、免疫沈降法を行い、H.Lそれぞれのサブユニットのc-DNAを用いて、HeLa.Fおよびその他の腫瘍フェリチンのサブユニットの検討を試みたい。