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コドン・アンチコドン相互作用と遺伝情報翻訳の忠実度

密码子-反密码子相互作用和遗传信息翻译的保真度

基本信息

批准号：
62580115
负责人：
西川一八
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

项目摘要

1.前年度に作成したtRNA^<phe>変異体のうち、アンチコドンをGAA、およびAAAに改変したものの酵母無細胞蛋白質合成系におけるpoly(U)依存性poly(phe)合成能に関して興味ある点が見い出されたので、さらに詳しく解析した。その結果、リボソームのPーsiteにいずれのtRNA^<phe>があるかにより、隣接のAーsiteのtRNA^<phe>へのペプチド鎖の転移効率が異なることが判明した。このことは、Pーsiteにおけるコドンーアンチコドン対合様式の違い〔tRNA^<phe>(AAA)はコドンUUUとWatsonーCrick型に、tRNA^<phe>(GAA)はwobble型に対合する〕が隣接するAーsiteに結合する次のアミノアシルーtRNAの結合効率に影響し、ひいてはリボソーム上での蛋白質合成速度の調節に関与する可能性を示唆しており、非常に興味深い。2.予定した計画のうち、U_<33>番塩基の置換を含む二重変異体の作成は、技術的困難に直面してpoly(U)依存性poly(phe)合成能を測定するに十分なだけのtRNA^<phe>二重変異体を調製することができなかった。反応条件等の検討から、この困難の最大の原因は酵母tRNA^<phe>の場合32番塩基が2′ー0ーメチル基を持つCmであるため、U_<33>を他の塩基に置換するのに必要なRNAリガーゼ反応が進みにくいためであるらしいことが判明した。そこで、現在は32位に2′ー0ーメチル基を持たないtRNA^<Tyr>に材料を変更して"二重変異体"の作成を試みている。3.アンチコドンループの鎖長は通常のtRNAでは7であるが、8であるような変異体、tRNA^<phe>(GAAA)およびtRNA^<phe>(AAAA)を作成した。これらはいずれもフェニルアラニン受容能、poly(U)依存性poly(phe)合成能を示すものの、天然型に比ベると効率はかなり落ちることがわかった。このことはリボソームでの暗号解読にアンチコドンループのコンホメーションも重要な帰与をしていることを示している。

1. The previous year's したtRNA^<phe>変variant のうち, アンチコドンをGAA, およびAAAに椉したもののyeast cell-free protein The quality synthesis system is based on poly(U) dependency poly(phe) synthesis energy and energy.そのRESULT, リボソームのPーsiteにいずれのtRNA^<phe>があるかにより, adjacencyのAーsiteのtRNA^<phe>へのペプチドLOCKの転efficiencyがdifferentなることが见明した.このことは、Pーsiteにおけるコドンーアンチコドン対合様styleのviolationい〔tRNA^<phe>(A AA)はコドンUUUとWatsonーCrick typeに、tRNA^<phe>(GAA)はwobbl e type に対合する〕が adjacent するA ーsiteにcombination する时のアミノアシルーtRNA のbinding efficiency し, ひいてはリボソーム上での Regulation of protein synthesis speed and する possibility をshow instigation しており, very interesting and deep い. 2. Predetermined plan, U_<33> fanbase replacement, double-double variation, production, technical difficulties faced head-on, poly(U) Existence of poly(phe) synthetic energy can be determined by testing the tRNA^<phe>double poly(phe) modulation method. The biggest reason for the difficulty of reaction conditions, etc. is the case of yeast tRNA^<phe>32 桩base 2′ー0ーメチルbaseをholdつCmであるため、U_<33>を他の塩基にreplacementするのにNecessaryなRNしいことが见明した。そこで、Now the 32nd に2′ー0ーメチルbased たないtRNA^<Tyr>にMaterial を変Change して"Double 変 variant"の成をtrial みている. 3.のtRNAでは7であるが、8であるような変variant、 tRNA^<phe>(GAAA)およびtRNA^<phe>(AAAA)した.これらはいずれもフェニルアラニン receptivity, poly(U) dependency poly(ph e) Synthetic energy shows that the natural type is more efficient than the natural type and is more efficient than the natural type.このことはリボソームでの code solution 読にアンチコドンループのコンホメーションもimportant な帰 and をしていることをshow している.