コドン・アンチコドン相互作用と遺伝情報翻訳の忠実度

密码子-反密码子相互作用和遗传信息翻译的保真度

• 批准号: 62580115
• 负责人: 西川 一八
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62580115/
• 关键词: コドン・アンチコドン相互作用; 遺伝情報の翻訳; 分子整形技術; コドンーアンチコドン相互作用

1.前年度に作成したtRNA^<phe>変異体のうち、アンチコドンをGAA、およびAAAに改変したものの酵母無細胞蛋白質合成系におけるpoly(U)依存性poly(phe)合成能に関して興味ある点が見い出されたので、さらに詳しく解析した。その結果、リボソームのPーsiteにいずれのtRNA^<phe>があるかにより、隣接のAーsiteのtRNA^<phe>へのペプチド鎖の転移効率が異なることが判明した。このことは、Pーsiteにおけるコドンーアンチコドン対合様式の違い〔tRNA^<phe>(AAA)はコドンUUUとWatsonーCrick型に、tRNA^<phe>(GAA)はwobble型に対合する〕が隣接するAーsiteに結合する次のアミノアシルーtRNAの結合効率に影響し、ひいてはリボソーム上での蛋白質合成速度の調節に関与する可能性を示唆しており、非常に興味深い。2.予定した計画のうち、U_<33>番塩基の置換を含む二重変異体の作成は、技術的困難に直面してpoly(U)依存性poly(phe)合成能を測定するに十分なだけのtRNA^<phe>二重変異体を調製することができなかった。反応条件等の検討から、この困難の最大の原因は酵母tRNA^<phe>の場合32番塩基が2′ー0ーメチル基を持つCmであるため、U_<33>を他の塩基に置換するのに必要なRNAリガーゼ反応が進みにくいためであるらしいことが判明した。そこで、現在は32位に2′ー0ーメチル基を持たないtRNA^<Tyr>に材料を変更して"二重変異体"の作成を試みている。3.アンチコドンループの鎖長は通常のtRNAでは7であるが、8であるような変異体、tRNA^<phe>(GAAA)およびtRNA^<phe>(AAAA)を作成した。これらはいずれもフェニルアラニン受容能、poly(U)依存性poly(phe)合成能を示すものの、天然型に比ベると効率はかなり落ちることがわかった。このことはリボソームでの暗号解読にアンチコドンループのコンホメーションも重要な帰与をしていることを示している。

1. Annual に done before し た tRNA ^ < phe > - variant の う ち, ア ン チ コ ド ン を the GAA, お よ び AAA に change - し た も の の yeast cell free protein GeChengXi に お け る poly real (U) dependence poly real (phe) can synthesis に masato し て tumblers あ が see い る point out さ れ た の で, さ ら に detailed し く parsing し た. そ の results, リ ボ ソ ー ム の P ー site に い ず れ の tRNA ^ < phe > が あ る か に よ り, 隣 の A ー site の tRNA ^ < phe > へ の ペ プ チ ド lock の move planning working rate が different な る こ と が.at し た. こ の こ と は, P ー site に お け る コ ド ン ー ア ン チ コ ド ン polices and others type の violations い (tRNA ^ < phe > (AAA) は コ ド ン UUU と Watson ー Crick に, tRNA ^ < phe > (the GAA) は wobble type に us seaborne す る) が 隣 meet す る A ー site に combining す る times の ア ミ ノ ア シ ル ー tRNA に influence し の combining working rate, ひ い て は リ ボ ソ ー ム on で の の protein synthesis speed regulating に masato and す を る possibility in stopping し て お り, very deep い に tumblers. 2. The designated し た project の う ち, U_ < > 33 times salt base の replacement を containing む double - variant の made は, technical difficulties に face し て poly real (U) dependence poly real (phe) synthesis can measure を す る に very な だ け の tRNA ^ < phe > double - variant を modulation す る こ と が で き な か っ た. Anti 応 conditions の 検 please か ら, こ の difficult の の biggest reason は yeast tRNA ^ < phe > の occasions 32 times salt base が 2 'ー 0 ー メ チ ル base を hold つ Cm で あ る た め, U_ < > 33 を he の salt base に replacement す る の に necessary な RNA リ ガ ー ゼ anti 応 が into み に く い た め で あ る ら し い こ と が.at し た. そ こ で, 2 'now は 32-bit に ー 0 ー メ チ ル base を hold た な い tRNA ^ < Tyr > を に materials - more し て "double - foreign の into を" try み て い る. 3. ア ン チ コ ド ン ル ー プ の lock long は usually の tRNA で は 7 で あ る が, 8 で あ る よ う な - variants, tRNA ^ < phe > (GAAA) お よ び tRNA ^ < phe > (AAAA) を made し た. こ れ ら は い ず れ も フ ェ ニ ル ア ラ ニ ン can let, poly real (U) dependence poly real (phe) can synthesis を shown す も の の type, natural に than ベ る と sharper rate は か な り fall ち る こ と が わ か っ た. こ の こ と は リ ボ ソ ー ム で の cipher solution 読 に ア ン チ コ ド ン ル ー プ の コ ン ホ メ ー シ ョ ン も important な 帰 and を し て い る こ と を shown し て い る.

项目成果

加藤幹男: Vira Origino. 16. 160-167 (1988)

加藤干雄：维拉·奥里尼奥。16. 160-167 (1988)

Kazuya Nishikawa: Proc. Space Life Sci. Colloq. ISAS, Tokyo. 10-12 (1987)

西川一也：Proc。

Kazuko Ogawa: Nucleic Acids Symposium Series. 19. 125-128 (1988)

小川和子：核酸研讨会系列。

Mikio Kato: Biochim.Biophys.Acta.

加藤干雄：Biochim.Biophys.Acta。

Kazuya Nishikawa: Nucleic Acids Symposium Series. 19. 121-123 (1988)

Kazuya Nishikawa：核酸研讨会系列。