Genetik, Enzymologie und strukturelle Basis der stringenten Stoffwechselkontrolle durch Guanosinpolyphosphate

多磷酸鸟苷严格代谢控制的遗传学、酶学和结构基础

• 批准号: 5229552
• 负责人: Professor Dr. Rolf Hilgenfeld
• 金额: --
• 依托单位: Fakultät für Biowissenschaften
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5229552?language=en
• 关键词: Genetik; Enzymologie; und; strukturelle; Basis

Im Mittelpunkt der beabsichtigten molekular- und strukturbiologischen Untersuchungen wird die Synthese und Hydrolyde von Guanosinpolyphosphaten [(p)ppGpp] in dem pathogenen Bakterium Steptococcus equisimilis stehen. Diese GtP-bzw. GDP-Derivate werden auch 'Alarmone' genannt und steuern die Adaption des Bakteriums an das Wirtsmilieu durch globale Stoffwechselumstellungen. Ihre Rolle in Pathogeneseprozessen (z.B. bei Streptococcus) bedarf dringend der Aufklärung. Das für Synthese und Hydrolyse dieser Guanosinderivate verantwortliche Protein RelSeq soll genetisch, enzymatisch und strukturell charakterisiert werden. Dazu sollen Deletionsmutanten konstruiert werden, die eine Lokalisierung der gegensätzliche Reaktionen katalysierenden aktiven Zentren auf dem Polypeptid erlauben werden. Im homologen Wirt sollen Untersuchungen zur Komplementation des relSeq-Mutanten-Phänotyps durchgeführt werden. Die (p)ppGppSynthese-Aktivität des gereinigten RelSeq-Proteins und seiner Muteine soll in vitro charakterisiert werden. Die dreidimensionale Struktur des Proteins und individueller Domänen soll durch Röntgenstrukturanalyse mit (bereits vorhandenen) Kristallen aufgeklärt werden. Schließlich soll die Bindung der Polyphosphate an die Elongationsfaktoren Tu (EF-Tu) und G (EF-G) strukturell bei hoher Auflösung charakterisiert werden.

[1] [m] . [m] . [m] . [b] . [b] . [b] . [b] . [c] . [c] . [c] . [c] . [c] .]这张GtP-bzw。国内生产总值（gdp）衍生产品包括“警报器”（Alarmone）基因和“细菌适应”（stesterdie adaptation），以及全球范围内的“细菌适应”（stoffwethselellungen）。在致病原性链球菌（zb.b estreptococcus）中起作用Aufklärung。Das fbr合成及水解酶解鸟苷衍生物verantworliche蛋白RelSeq .遗传学、酶学和结构特性研究。大足sollen Deletionsmutanten konstruiert werden， die eine Lokalisierung der gegensätzliche Reaktionen catalsierenden aktiven Zentren audem polypeptide erlaubenwerden。我同源Wirt sollen Untersuchungen zur互补des relSeq-Mutanten-Phänotyps durchgefhrt werden。Die (p)ppGppSynthese-Aktivität des gereinigten RelSeq-Proteins and seiner Muteine soll的体外特性分析。蛋白质与个体的三维结构Domänen soll durch Röntgenstrukturanalyse mit (bereits vorhandenen) Kristallen aufgeklärt werden。Schließlich soll die binding der Polyphosphate and die Elongationsfaktoren Tu (EF-Tu) and G (EF-G) strukturrell bei hoher Auflösung charakterisiert werden。