エストロゲンによるブタ子宮筋のオキシトシン感受性増大効果:受容体数とCa^<2+>動態の修飾

雌激素对增加猪子宫肌层催产素敏感性的影响：受体数量和 Ca^2+ 动态的改变

• 批准号: 63560294
• 负责人: 種池 哲朗
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Rakuno Gakuen University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560294/
• 关键词: 子宮筋; オキシトシン; 受容体; Ca^<2+>動態; 器官培養; 性ステロイドホルモン; エストロゲン; プロゲステロン

1.性ホルモンによるoxytocin(oxy)受容体数の調節 (1)ランドレースF_1種の非妊娠、未経産ブタ子宮角先端部より縦走筋(LM)と輪走筋(CM)を摘出し、酵素処理(0.1%コラゲナーゼ、1%パパイン、0.025%DNase)して得られる単離平滑筋細胞を用いて^3H_3ーoxyの特異的受容体結合実験を試みた。Trypan blue排除試験により、これら単離平滑筋細胞標本の生存率は、LMで91.5±0.97%(n=10)、CMで92.3±1.1%(n=11)であった。(2)^3Hーoxyと単離平滑筋細胞との結合は飽和性であった。LMでの解離定数(Kd)は、2.9±0.9nM(n=5)、CMのそれは2.53±0.9nM(n=4)で両者間で差はなかった。このKd値は、oxyの濃度収縮曲線から得られるLMでのED_<50>濃度(2nM)と類似していた。スキャチャード解析より求めた^3Hーoxyの最大結合部位数(Bmax;fmole/細胞100万個)は、LMで62.2±13.3(n=5)、CMでは1.4±0.2であった。後者で著明に低かった。(3)Estradiol 17β(E_2、2×10^<-10>M)処置下で器官培養した子宮筋からの単離平滑筋標本における^3Hーoxyの13max値は、培養日数に依存して増加した(1日:LM77.7±16.2,CM5.45±2.51;2日:LM111.4±7.4,CM30.6±2.23;3日:LM132.3±5.9,CM34.7±6.7)。このE_2によるoxyのBmax値の増大効果は、E_2処置の前か後にprogesterone(p.10^<-7>M)あるいはcyclokeximide(10^<-5>M)存在下で培養すると発現しなかった。2.性ホルモンによるCa^<2+>動態の修飾 (1)oxy(10^<-7>M)は、Ca^<2+>除去、高濃度K^+(148mM)液下で発現するLMのCa^<2+>収縮を増強した。この増強効果は、E_2(10^<-10>M)下で培養(1ー5日)した標本ではより増加した。(2)oxyは、細胞内Ca^<2+>を遊離させ、収縮を発現させた。このoxy収縮は、E_2下培養標本では著明に増大した。以上より、ブタの子宮LMとCMにおけるoxy反応性は、その受容体数と相関していること、oxy受容体はE_2とPにより増減することがin vitro培養筋でも再現できること、oxyは細胞外Ca^<2+>流入と細胞内Ca^<2+>遊離を促進し収縮を惹起すること、この両過程はE_2によってさらに増強されることが明らかとなった。

1. Sex ホ モ モ による によるoxytocin(oxy) is regulated by the number of capacitors (1) ラ ン ド レ ー ス F_1 の non pregnancy, not 経 production ブ タ Angle apex of uterine よ り 縦 go go jin (LM) と round steel (CM) を pick out し, enzyme 処 (0.1% コ ラ ゲ ナ ー ゼ, 1% パ パ イ ン, 0.025% DNase) し て have ら れ る 単 を from smooth muscle cells with い て ^ 3 h_3 ー foxy の specific let body junction He will conduct a を test みた. Trypan blue exclusion test に よ り, こ れ ら 単 specimens は の survival away from the smooth muscle cells, LM で 91.5 + / - 0.97% (n = 10), CM で 92.3 + / - 1.1% (n = 11) で あ っ た. (2)^3H <s:1> oxyと単 smooth tendon cells と <s:1> binding と単 saturation であった. LM で の dissociation constant (Kd) は, 2.9 + / - 0.9 nM (n = 5), CM の そ れ は 2.53 + / - 0.9 nM (n = 4) で struck the difference between で は な か っ た. The <s:1> <s:1> Kd value and the oxy <s:1> concentration contraction curve ら ら result in られるLMで <s:1> ED_<50> concentration (2nM)と similar to た て た た た. Analytical よ ス キ ャ チ ャ ー ド り o め た ^ 3 h ー foxy の maximum junction digits (Bmax; fmole / 1 million) は, LM で 62.2 + / - 13.3 (n = 5), CM で は 1.4 + / - 0.2 で あ っ た. The latter で writes に low った った. (3) 17 beta Estradiol (E_2, 2 x 10 ^ < - > 10 M) 処 place で organ culture し た uterine muscle か ら の 単 from smooth muscle specimens に お け る ^ 3 h ー foxy の 13 Max numerical は, training days に dependent し て raised plus し た (1: LM77.7 plus or minus 16.2, CM5.45 + / - 2.51; 2 days :LM111.4±7.4,CM30.6±2.23; On the 3rd :LM132.3±5.9,CM34.7±6.7. こ の E_2 に よ る foxy の Bmax numerical の raised large unseen fruit は, E_2 処 before buy の か after に progesterone (p. 10 ^ 7 < - > M) あ る い は cyclokeximide (10 ^ < - > 5 M) in the presence of で cultivate す る と 発 now し な か っ た. 2. Sexual ホ ル モ ン に よ る Ca ^ 2 + > < dynamic の modification (1) the foxy (10 ^ 7 < - > M) は, Ca ^ 2 + > < removal, high concentration of K ^ + (148 mm) under fluid で 発 now す る LM の Ca ^ < 2 + > 収 shrinkage を raised strong し た. The <s:1> <s:1> enhancement effect was achieved by で culture (1 <s:1> 5 days) of で た specimens under E_2(10^<-10>M), which showed an increase in で, よ and <s:1> た. (2)oxy を, intracellular Ca^<2+>を free させ, condensation を occurrence させた. The で で of the cultured specimens under and E_2 shows an increase in に た. Above よ り, ブ タ の uterus LM と CM に お け る foxy anti 応 は, そ の by let body number と phase masato し て い る こ と, foxy let body は E_2 と P に よ り raised minus す る こ と が in Vitro culture reinforcement で も reappearance で き る こ と, foxy は extracellular Ca ^ 2 + > < inflows と intracellular Ca ^ 2 + > < free を promote し 収 shrinkage を provoked す る こ と, こ の struck process は E_2 に よ っ て さ ら に raised strong さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

K.Esashika;H.Miyazaki;T.Taneike: The Japanese Journal of Pharmacology. 46. 268 (1988)

K.Esashika；H.Miyazaki；T.Taneike：日本药理学杂志。