カテコールアミン分泌過程における顆粒と細胞膜の融合

儿茶酚胺分泌过程中颗粒与细胞膜的融合

• 批准号: 63570106
• 负责人: 泉 太
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570106/
• 关键词: 副腎髄質; カテコールアミン; 分泌; digitonin; Caイオン; ATP; Cーkinase; アラキドン酸

副腎髄質からのカテコールアミン(CA)分泌は、Caイオンに依存したexocytosisによりおこる。CA含有顆粒と細胞膜の融合がその基本となっているが、その分子機序とCa作用については不明である。本研究では、培養ウシ副腎髄質細胞を用いてCa作用発現機序を想定し、分離した顆粒の系においてそれを再現しようと試みた。(1)digitonin(20μM、5分間)処理によりpermeabilizeさせた細胞において微量(μMオーダー)のCaは、ATPーMgに依存したCA分泌をおこした。しかし、digitonin処理後10分間放置した後では、CaによるCA分泌は認められなかった。このことは、digitonin処理細胞にはCA分泌に必要な要素が全て保持されているが、そのあるものは比較速かに細胞外に漏出することを示すものである。(2)漏出性の要素は細胞質由来と考えられること、また顆粒と親和性をもつタンパクであると想定されるので、顆粒膜を固定したアフイニイテイカラムを作成し、Caの存在下にのみ顆粒と結合するタンパクを分離した。しかしこのタンパクは、顆粒からのCA遊離をおこさなかった。従って細胞構成々分を再構成するだけでは十分ではなく、空間的な再構成をおこなうことが重要であることがうかがわれた。(3)近年、CーkinaseがCaに依存した諸々の細胞機能の発現に関与することが知られるようになった。我々はdigitonin処理副腎髄質細胞において、アラキドン酸がCaとATPーMgに依存したCA分泌を促進すること、アラキドン酸は細胞質分画のCーkinaseを活性化することを認めた。このアラキドン酸の作用は、cis型不飽和脂肪酸に共通のものであることを明らかにした。現在、漏出因子とCーkinaseの関係、Cーkinaseの内因性基質について検索している。

Adrenal mass marrow か ら の カ テ コ ー ル ア ミ ン は (CA) secretion, CA イ オ ン に dependent し た exocytosis に よ り お こ る. CA containing particles と の cell membrane fusion が そ の basic と な っ て い る が, そ の molecular machine sequence と CA に つ い て は unknown で あ る. This study で は, cultivating ウ シ adrenal marrow stromal cells を with い て Ca role 発 now machine sequence を し scenarios, separating し た particles の is に お い て そ れ を reappearance し よ う と try み た. 20 microns, 5 (1) digitonin (points) between 処 Richard に よ り permeabilize さ せ た cells に お い て trace (mu M オ ー ダ ー) の Ca は, ATP ー Mg に dependent し た Ca secretion を お こ し た. After 10 minutes of treatment by <s:1> and digitonin, た was placed and で で, Caによる, CA secreted and で recognized められな った った. こ の こ と は, digitonin 処 Richard cells に は CA secretion に な elements が て keep all necessary さ れ て い る が, そ の あ る も の は comparison speed か に extracellular に leakage す る こ と を shown す も の で あ る. (2) leakage の factors は cytoplasmic origin と exam え ら れ る こ と, ま た particles と affinity を も つ タ ン パ ク で あ る と scenarios さ れ る の で を, granule membrane fixed し た ア フ イ ニ イ テ イ カ ラ ム を し consummate, the presence of Ca の に の み particles と combining す る タ ン パ ク を separation し た. {" e ":" text ":" <s:1> をお <s:1> <s:1> タ パ パ, granular をお ら, free CA をお をお さな った った った "}" 従 っ て cells を 々 points to constitute す る だ け で は very で は な く, space な to constitute を お こ な う こ と が important で あ る こ と が う か が わ れ た. (3) in recent years, C ー kinase が Ca に dependent し た the 々 の cell function の 発 now に masato and す る こ と が know ら れ る よ う に な っ た. I 々 は digitonin 処 Richard adrenal marrow stromal cells に お い て, ア ラ キ ド ン acid が Ca と ATP ー Mg に dependent し た Ca secretion を promote す る こ と, ア ラ キ ド ン acid は cytoplasm points draw の C ー kinase を activeness す る こ と を recognize め た. The action of <s:1> アラキド <s:1> acid <e:1> is similar to that of CIS-type unsaturated fatty acids に, which are shared by <s:1> <s:1> である である とを とを and とを. Now, the leakage factor とC <s:1> kinase <e:1> is related, the intrinsic matrix of C <s:1> kinase <e:1> is に に て検 て検 て検, and so is the <s:1> る る.

项目成果

Y.Uezono;F.Izumi: Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol.

Y.Uezono；F.Izumi：Naunyn-Schmiedeberg 的 Arch Pharmacol。

K.Yokota;F.Izumi: Journal of Neurochemistry. 51. 246-251 (1988)

K.Yokota；F.Izumi：神经化学杂志。

N.Yanagihara;F.Izumi: Journal of Neurochemistry. 49. 1740-1746 (1987)

N.Yanagihara；F.Izumi：神经化学杂志。

N.Yanagihara;F.Izumi: Journal of Neurochemistry.

N.Yanagihara；F.Izumi：神经化学杂志。

Y.Koda;F.Izumi: Neuroscience.

Y.Koda；F.Izumi：神经科学。