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抗イデイオタイプ抗体を用いたヒトロタウィルス感染成立機序の解析

抗独特型抗体分析人轮状病毒感染机制

基本信息

批准号：
63570423
负责人：
佐藤徹雄
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

われわれはヒトロタウィルス (HRV) が1日雛赤血球を凝集する活性 (HA) があり、これがトリプシンによるHRV活性化 (感染性) とは逆に減少、消失することを初めて認め報告して来た。今回はHAに対する単クローン抗体 (mAb ) を作成し、そのイディオタイプ (Id) に対する同系mAbを作成し、HRV感染機序の解析を試みた。1.mAbK-1532はHRV KUN株のウィルス蛋白VP4に特異的に反応する抗体で、HA阻止活性 (HI) と感染中和活性を有する。この精製mAbを免疫原として同系mAb抗Id抗体を作成した。中和阻止活性を有する2つのmAb、 11Aと21Dが得られた。2.アフィニティクロマトグラフィー精製抗IdmAb11Aを125Iで標識し、K-1532との特異的結合能を確認した。この結合性にもとずいて他のmAb との交叉反応性を調べた結果、K-1532と同じ特異性を有するmAbK-376 のみ15%の交叉反応性を示した。3.得られた抗IdmAb11Aと21DはK-1532のHIを阻止したが、他のmAbのHIは阻止しない。また、11Aまたは21D抗体で処理した赤血球を用いたKUN株のHA活性は低下し、これらの抗IdmAbNO赤血球への特異的結合が示唆された。4.11Aと21DはKUN株に対する免疫状血清の中和活性を阻止したが、他の血清型ウィルスに対する抗血清の中和活性を阻止しない。5.抗IdmAbを用いてマウスを免疫し、抗Id-Id抗体の産生が確認された。また、KUN株免疫による抗体産生能を増強した。6.MA104細胞を抗IdmAbで処理したあとKUN株を感染させると、その感染性が低下する。VP4に対するレセプターの存在を示唆す。

The activity of erythrocyte aggregation (HA) is reduced and the activity of HRV is reduced. This time, we tried to analyze the infection mechanism of HRV by creating a homolog antibody (mAb ) against HA. 1. mAbK-1532 has antibody, HA blocking activity (HI) and infection neutralizing activity specific for VP4 protein of HRV KUN strain. The purified mAb was prepared from a homologous mAb. Neutralizing and blocking activity of 2 mAb, 11A and 21D 2. Identification of anti-Id mAb 11A and specific binding energy of K-1532 The binding activity of mAb K-1532 and the cross-reactivity of mAb K-376 are shown. 3. Anti-Id mAb 11A and 21D are blocked by HI of K-1532. The HA activity of KUN strain treated with 11A and 21D antibody was decreased, and the specific binding of anti-IdmAbNO erythrocytes was demonstrated. 4. 11A and 21D inhibit neutralizing activity of immune serum against KUN strain and neutralizing activity of antiserum against other serotypes. 5. Anti-Id antibody production is confirmed by anti-Id antibody production. Antibody production by KUN strain was enhanced. 6. MA104 cells were infected with IdmAb and their infectivity was reduced. VP4: The presence of the virus.