权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

らん藻細胞膜における情報伝達たんぱく質の検索と生化学的解析

蓝藻细胞膜信号蛋白的搜索和生化分析

基本信息

批准号：
01540559
负责人：
大森正之
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01540559/
关键词：
らん藻情報伝達たんぱく質 Anabaena cAMP アデニル酸シクラ-ゼ G-タンパク質

项目摘要

らん藻Anabaena cylindrica細胞内のcAMP濃度は、光照射下では、通常60〜100pmol・mg^<-1>Chl.であるが、光照射後暗条件にするとcAMP濃度は急激に増加し、約一分後には数倍に達する。このような短時間におけるcAMP量の変化は、cAMP合成酵素のアデニル酸シクラ-ゼの活性が、シグナル伝達タンパク質であるG-タンパク質により制御されていることを示唆している。そこで、G-タンパク質がらん藻に存在するか否かについて検討した。細胞を超音波破砕した後、5000×gで10分間遠心し、上清画分を試料とした。試料を〔^<35>S〕GTPrSとインキュベ-トしてから、遊離GTPrSをセファデックスG-25のゲル〓過により取り除き、さらにセファデックスG-100によりタンパク質の分離を試みた。その結果何種類かのGTPに結合能を有するタンパク質が検出された。G-タンパク質は原核生物において報告がなく、〔^<35>S〕GTPrSとの結合だけでは存在の確認はできない。そこで、動物において知られているG-タンパク質の共通アミノ酸配列部分の16残基をペプチド合成機により作製し、それを抗原として、ウサギより得た抗体を入手し、ウェスタンブロット法により検索を行なった。その結果、この抗体に反応するタンパク質の存在を確認することができたが、タンパク質のバンドは一本ではなく、複数存在したため、どのタンパク質が本当のG-タンパク質であるかを同定することはできなかった。今後さらに実験を進め、G-タンパク質の同定を完了させる予定である。また、Anabaena cylindricaより得た細胞抽出液にアデニル酸シクラ-ゼ活性、フォスフォジエステラ-ゼ活性が存在することを明らかにした。以上の結果から、らん藻にもcAMPカスケ-ドが存在すると結論した。

Anabaena cylindrica: intracellular cAMP degree, light exposure, usually 60 ~ 100pmol ·mg ^ & lt;-1>Chl. After exposure to light, the dark condition, the degree of cAMP, the intensity of stress, the intensity of light, the intensity of light, the degree of darkness, the degree of darkness, the After a short period of time, the levels of camp and cAMP synthesis enzymes were measured. The activity of camp was determined by enzyme assay. The activity of camp and the activity of camp were determined by enzyme chromatography. No, no. After the ultrasonic wave was broken, the heart was broken in 5000 × g