シアノバクテリア信号伝達タンパク質の分子アーキテクチャー

蓝藻信号蛋白的分子结构

基本信息

  • 批准号:
    12019211
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

シアノバクテリアにおけるゲノム解析は、すでに3種類のラン藻において塩基配列がほぼ決定された。全ゲノム解析の次の段階として、全タンパク質の構造解析と機能解析が期待される。構造が未知のタンパク質については、既知のタンパク質のX線解析データを基にアミノ酸配列の相同性からコンピューターによる構造予測が可能である。我々は、CyaGの触媒部位をGSTとの融合タンパク質として大腸菌で大量発現させ、アフィニテイークロマトグラフィー、ゲル濾過などの方法によってタンパク質の精製した。次に触媒部位の3つのアミノ酸を置換した変異体を作り、ATP,GTPを基質として酵素活性を測定したところ、変異体はアデニル酸シクラーゼではなくグアニル酸シクラーゼを合成していることが明らかとなった。アミノ酸を置換した触媒部位と置換する前の触媒部位について、ホモロジーモデリングにより、基質との結合の構造予測を行ったところ、アミノ酸置換によって基質特異性が変化したことが確認された。一方、cAMP分解酵素であるcAMPホスホジエステラーゼに関しては、活性の存在は報告されているものの遺伝子の構造や活性調節機構についても全く不明であった。我々は、大腸菌のcAMPホスホジエステラーゼ遺伝子cpdAと相同性を持つorfを見つけた。大腸菌においてこのorfを(His)x6タグ融合タンパク質として発現させ、精製を行った。この精製タンパク質はcAMP分解活性を示した。そこで大腸菌のホスホジエステラーゼをモデルとしてこの酵素の構造を予測した
In this connection, we need to make a decision on the basis of the analysis of the information system and the information system of the system. Full-time analysis, analysis, analysis and analysis. If you don't know what you're going to do, you've got to know that you don't know what you're going to do. You know, you don't know what's going on, you know, you know, you know, The GST and CyaG catalyst parts were fused with a large number of bacteria in the presence of a large number of bacteria. In the second part of the catalyst, the acid content of the catalyst was determined, the enzyme activity of the catalyst was determined by ATP,GTP, and the enzyme activity was determined by the enzyme activity test. In the first place, the catalyst part is used in the first place, the catalyst part is in the front part, the catalyst part is in the first place. On the one hand, cAMP-decomposing enzymes, cAMP enzymes, enzymes, We know that the cAMP bacteria are similar to each other in terms of their cpdA. They hold the same position as the orf bacteria. The orf (His) x6 fusion is the best way to detect and improve the quality of the product. The activity of cAMP decomposition is shown in this paper. The fungus, the bacteria, the enzymes, the enzymes.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ohmori,K 他: "Sodium requirement for cAMP-induced"Microbes and Environments. (印刷中).
Ohmori, K 等人:“cAMP 诱导的钠需求”微生物和环境(正在出版)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yoshihara,S 他: "Mutational analysis of genes involved in pilus"Plant Cell Physiol.. 42. 63-73 (2001)
Yoshihara,S 等:“菌毛相关基因的突变分析”Plant Cell Physiol.. 42. 63-73 (2001)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yoshimura,H 他: "Identification and characterization of a novel"J.Biol.Chem.. 275. 6241-6245 (2000)
Yoshimura, H 等人:“小说的识别和表征”J.Biol.Chem.. 275. 6241-6245 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
大森正之 他: "新しい植物生命科学"講談社サイエンティフィク. 132 (2001)
Masayuki Omori 等:“新植物生命科学”讲谈社科学 132 (2001)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kasahara,M 他: "A novel cyanobacterial adenylate cyclase;"J.Biol.Chem.. (印刷中).
Kasahara, M 等人:“一种新型蓝藻腺苷酸环化酶;”J.Biol.Chem..(出版中)。
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  • 发表时间:
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    0
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  • 通讯作者:
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知道了