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シアノバクテリア信号伝達タンパク質の分子アーキテクチャー

蓝藻信号蛋白的分子结构

基本信息

批准号：
11132208
负责人：
大森正之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132208/
关键词：
ラン藻アデニル酸シクラーゼ cAMP CRP DNA結合能

项目摘要

ラン藻からの遺伝子の単離に関しては、これまでに10種類のアデニル酸シクラーゼの遺伝子の単離に成功し、そのシークエンスを決定した。ラン藻のcyaの触媒領域は大腸菌などのcyaのそれとは構造が全く異なっており、むしろヒトやウシなどのほ乳類と強い相同性を示した。それら遺伝子の塩基配列から推定される酵素タンパク質の一次構造はその触媒領域において互いに良く似ており、ラン藻のcyaは大きな遺伝子ファミリーを形づくっていることが明らかとなった。酵素の触媒領域はC-末端側にあり、そこからN-末端側に向けてそれぞれのCyaは特徴的な構造を持つ。その中の一つcyaCを破壊したとところ、赤色光や近赤外光などに対する細胞内光信号の応答がみられなくなった。cyaCは光信号の伝達に関与していることが示された。このcyaCはバクテリアの2成分制御系のタンパク質をコードしていた。cAMP結合タンパク質の遺伝子の単離に関しては、はじめ候補として選んだ80個の遺伝子のDNAシーケンスと大腸菌CRPとの相同性を指標に絞り込み、3個の遺伝子にたどりついた。それぞれの遺伝子を大腸菌で大量発現させ、得られたタンパク質を精製し、cAMPとの結合を平衡透析法により測定した。その結果、sycrp 1はcAMPとの結合定数が3μmolarであること、タンパク質2分子に1分子のcAMPが結合することが明らかになった。このような結果からSycrp1がラン藻のCRPであると結論した。さらに、大腸菌のCRP結合DNA保存配列に対する結合をゲルシフト法により検討したところ、Sycrp1はDNA結合能を持つことが明らかになった。

10 types of bacteria and fungi are selected according to their characteristics. The catalytic domain of Escherichia coli is different from that of Escherichia coli. The enzyme structure of the enzyme is estimated to be the primary structure of the enzyme. The enzyme structure of the enzyme structure is estimated to be the primary structure of the enzyme structure. The catalytic domain of the enzyme is characterized by the structure of the C-terminal side and the N-terminal side. In addition, the intracellular light signal is detected by the red light and the near-red light. CyaC light signal transmission and detection The cyaC is a two-component control system. cAMP binding protein is the most important component of DNA binding protein in E. coli. It is the most important component of DNA binding protein in E. coli. A large amount of E. coli was produced, purified, and cAMP was determined by equilibrium dialysis. As a result, sycrp 1 is bound to cAMP at a constant rate of 3μ mol. Sycrp1 is the result of this study. In addition, E. coli CRP binding DNA preservation alignment, binding, Sycrp1 DNA binding, binding