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シアノバクテリア信号伝達タンパク質の分子アーキテクチャー

蓝藻信号蛋白的分子结构

基本信息

批准号：
11132208
负责人：
大森正之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132208/
关键词：
ラン藻アデニル酸シクラーゼ cAMP CRP DNA結合能

项目摘要

ラン藻からの遺伝子の単離に関しては、これまでに10種類のアデニル酸シクラーゼの遺伝子の単離に成功し、そのシークエンスを決定した。ラン藻のcyaの触媒領域は大腸菌などのcyaのそれとは構造が全く異なっており、むしろヒトやウシなどのほ乳類と強い相同性を示した。それら遺伝子の塩基配列から推定される酵素タンパク質の一次構造はその触媒領域において互いに良く似ており、ラン藻のcyaは大きな遺伝子ファミリーを形づくっていることが明らかとなった。酵素の触媒領域はC-末端側にあり、そこからN-末端側に向けてそれぞれのCyaは特徴的な構造を持つ。その中の一つcyaCを破壊したとところ、赤色光や近赤外光などに対する細胞内光信号の応答がみられなくなった。cyaCは光信号の伝達に関与していることが示された。このcyaCはバクテリアの2成分制御系のタンパク質をコードしていた。cAMP結合タンパク質の遺伝子の単離に関しては、はじめ候補として選んだ80個の遺伝子のDNAシーケンスと大腸菌CRPとの相同性を指標に絞り込み、3個の遺伝子にたどりついた。それぞれの遺伝子を大腸菌で大量発現させ、得られたタンパク質を精製し、cAMPとの結合を平衡透析法により測定した。その結果、sycrp 1はcAMPとの結合定数が3μmolarであること、タンパク質2分子に1分子のcAMPが結合することが明らかになった。このような結果からSycrp1がラン藻のCRPであると結論した。さらに、大腸菌のCRP結合DNA保存配列に対する結合をゲルシフト法により検討したところ、Sycrp1はDNA結合能を持つことが明らかになった。

Please tell me that you are successful and that you will not be able to make a decision. In the field of cya catalyst, large bacteria are produced in the field of cya. The whole system is designed to show that the milk is the same. It is presumed that there is a good relationship between each other in the field of catalyst in the field of catalysis, and that in the field of catalysis, there is a good relationship between each other in the field of catalyst. in this paper, it is concluded that there is a good relationship in the field of catalysis, and that there is a good relationship between each other in the field of catalysis. In the field of enzyme catalysis, C-terminal and N-terminal enzymes are responsible for the production of specific Cya products. In the middle of the cyaC, the red light, the near-red light, the intracellular light signal, the red light, the intracellular light signal, the red light, the red light, the The optical signal of the cyaC signal is displayed in the same way as the optical signal. The two-component system is very popular in the cyaC system. The combination of cAMP and DNA is used to describe the similarity of bacteria in each of the 80 clusters and the three clusters of the host. In the presence of a large number of bacteria, a large number of bacteria were detected, and the results were determined by the combination of cAMPase and equilibrium dialysis. The results showed that the number of sycrp 1 μ molar cAMP fragments was 3 μ mol, and that of cAMP 2 molecules was 1 μ molar. The results of this study show that the results of the Sycrp1 experiment show that there is no significant difference between the two groups in terms of the results of the CRP study. The combination of CRP and DNA was used to save the array of bacteria. The combination of Sycrp1 and DNA was able to detect the difference between the two groups.