植物起源リボソ-ム不活化蛋白質の構造と機能に関する研究

植物源核糖体失活蛋白的结构与功能研究

• 批准号: 01560101
• 负责人: 船津 軍喜
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01560101/
• 关键词: リボゾ-ム不活化蛋白質; 蛋白合成阻害蛋白質; 蛋白質の一次構造; 植物種子蛋白質

本研究は植物起源のリボソ-ム不活化蛋白質(RIP)の構造並びに構造・活性相関の解明を目的としたもので、本年度は以下の成果を得た。1.RIPの全アミノ酸配列の決定RIPをCNBrまたは各種プロテア-ゼで分解して得られたペプチドを逆相HPLCで分離精製した後、DABITC/PITC法によりアミノ酸配列を調べ、それらのつながりから全アミノ酸配列を決定した。(1)ニガウリ種子のRIP(momordin):250個のアミノ酸から成り、分子内にS-S結合を有せず、Asn-227に糖が結合することが明らかになった。その配列はluffin-a(ヘチマ種子)及びtrichosantin(カラスウリ根茎)とそれぞれ67%及び56%同一であることがわかった。(2)アメリカヤマゴボウ種子のRIP(PAP-S):257個のアミノ酸から成り、分子内に2個のS-S結合を有し、Asn-44、-10、-243にGlcNAcが結合することが明らかになった。その配列はMAP(オシロイバナ)及びリシンA鎖(ヒマ種子)とそれぞれ37%及び36%同一であることがわかった。2.RIPのリボソ-ム不活化活性に関与するアミノ酸残基の検索・同定RIPの活性に及ぼす化学修飾の影響から、活性に関与するアミノ酸残基の検索を行ない、さらにその一次構造上の位置を決定した。(1)リシンA鎖:Arg残基のほか、Tyr残基も活性に関与することを見出し、それはTyr-194、Tyr-243、Tyr-257のいずれかであると推定した。(2)Luffin-a:活性に関与するアミノ酸残基としてHis-140、Tyr-165、Lys-231を同定した。(3)Momordin-a:Lys-231(luffin-aと同じ)のほかTyr残基が活性に関与することが見出された。(4)PAP-S:活性に関与するアミノ酸残基としてArg-68とArg-238が同定された。

This study aimed to elucidate the structure and activity of the plant origin protein (RIP), and the following results were obtained this year. 1. The determination of acid alignment of RIP by CNBr and DABITC/PITC method. (1)Rip(momordin):250 amino acid residues, intramolecular S-S binding residues, Asn-227 sugar binding residues. The same is true for luffin-a( (2)RIP(PAP-S):257 amino acid residues, 2 S-S binding residues, Asn-44,-10,-243 GlcNAc binding residues. The same is true for MAP() and PRI ( 2. The activity of RIP is related to the identification of acid residues and the effect of chemical modification on RIP activity. (1)A lock:Arg residues, Tyr residues, activity related to this, Tyr-194, Tyr-243, Tyr-257, and so on. (2)Luffin-a: Activity is identical to that of His-140, Tyr-165, Lys-231. (3)Momordin-a:Lys-231(luffin-a) and Tyr residues are active. (4)PAP-S: Activity is related to Arg-68 and Arg-238.

项目成果

南雄二: "ニガウリ種子リボソ-ム不活化蛋白質momordin-aの一次構造" 日農化誌. 64. 285 (1990)

Yuji Minami：“苦瓜籽核糖体失活蛋白苦瓜素-a的一级结构”日野化学杂志。 64. 285 (1990)

船津軍喜: "Involvemtnt of C-terminal region in inhibition of protein synthesis by ricin A-chain" Agric.Biol.Chem.53. 1173-1174 (1989)

Gunki Funatsu：“C 末端区域参与蓖麻毒素 A 链抑制蛋白质合成”Agric.Biol.Chem.53（1989）。

弓誠実: "アメリカヤマゴボウ種子抗ウィルス蛋白質PAP-Sの一次構造" 生化学. 61. 1311 (1989)

Makoto Yumi：“美洲商陆种子抗病毒蛋白 PAP-S 的一级结构”生物化学 61. 1311 (1989)。

木村吉伸: "Structural analyses of sugar chains from ricin A-chain variant" Agric.Biol.Chem.54. 157-162 (1990)

Yoshinobu Kimura：“来自蓖麻毒素 A 链变体的糖链的结构分析”Agric.Biol.Chem.54 (1990)。

渡辺啓一: "Identification of lysine residue at or near active site of luffin-a,a protein biosynthesis-inhibitory protein from seeds of Luffa cylindrica" J.Biochem.106. 977-981 (1989)

Keiichi Watanabe：“来自丝瓜种子的蛋白质生物合成抑制蛋白 luffin-a 或其附近活性位点的赖氨酸残基的鉴定”J.Biochem.106（1989）。