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植物の自己防護蛋白質の構造と機能に関する研究

植物自我保护蛋白的结构与功能研究

基本信息

批准号：
02660100
负责人：
船津軍喜
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.2,3種の防護蛋白質の分離とアミノ酸配列各蛋白質をCNBrまたは各種プロテア-ゼで断片化し,得られたペプチドを逆相HPLCで分離・精製した後、アミノ酸配列を調べ、それらのつながりを調べることにより、全アミノ酸配列を決定した。(1)抗ウィルス性蛋白質:アメリカヤマゴボウからのPAPーS及びヘチマ種子からのluffinーbの全アミノ酸配列及び糖構造を決定した。いずれも、250残基のアミノ酸から成り、3箇所に存在するAsnーXーThr/Ser配列のAsn残基に結合する糖は、いずれもGlcNAcであることがわかった。(2)抗かび蛋白質:らい麦種子から3種のキチナ-ゼRCーa,ーb,ーcを分離し,それぞれ36,28,28kDaで,等電点9.7,10.0,10.2であることを明らかにした。これらのうち、RCーcの全アミノ酸配列及びRCーaの部分アミノ酸配列を決定した結果、RCーcのNー末端はRCーaの50番目に相当し、両者は93%の相同性を有することがわかった。2.構造・活性相関防護蛋白質の構造・活性相関を解明するため、種々の化学修飾の活性に及ぼす影響を調べ、活性に関与するアミノ酸残基を同定した。(1).ヘチマ種子リボソ-ム不活化蛋白質luffinーa:His,Tyr,Lys残基及びCOOH基を修飾すると著しく活性が低下した。修飾残基として、Hisー140、Tyrー165、Lysー231が同定され、これらが活性に関与することが示唆された。(2).アメリカヤマゴボウ種子抗ウィルス性蛋白質PAPーS:Arg,Tyr残基及びCOOH基の修飾により、それぞれ2.2、6、3残基修飾され、活性は8、9、6%に低下した。また、修飾Arg残基としてArgー67/68,ー240が同定された。(3).ニガウリ種子リボソ-ム不活化蛋白質momordinーa:His、Tyr、Lys残基及びCOOH基をそれぞれ、1、3.6、2.5及び13残基修飾すると、活性は10、10、2.5及び13%に低下し、これらの活性への関与が示唆された。

1.2 the three kinds of protective proteins were separated and separated from each protein. Each kind of protein CNBr was separated and fragmented, and the reverse phase HPLC of each protein was obtained. After the separation of the concentrate, the determination of the concentration of amino acid and the determination of total acid were determined. The main results are as follows: (1) Anti-antiviral protein: antiviral protein, antiviral protein, anti-tumor protein, protein, There are Asn residues, X Thr/Ser, Asn residues, sugar, GlcNAc residues, sugar, sugar. (2) Anti-malondialdehyde: three kinds of antisera of wheat mildew were separated from each other, and the RC were separated from each other. The temperature was 36, 28, 28kDa, and the other point was 9.7, 10.2, 10.2, respectively. The results of the determination of the results of the complete acid configuration of the RC, the full acid configuration of the RC and the acid configuration of the part of the RC, the results of the determination of the end of the RC, the number of times 50 times, and the similarity between the two groups are similar in 93%. two。 The activity of protective protein was determined by chemical modification, and the acid residue was determined by the same assay as the acid residue. (1)。 Inactivating protein luffin-inactivating protein Tyrrhine Lys residues and COOH genes were modified and characterized by low activity. Modification of residues, His140,165, Lys 231, bioactivity and instillation were performed. (2)。 Antigenicity protein PAP, antigenicity, bioactivity, bioactivity. The Arg residues were modified and the Arg residues were identified as 67 and 68, respectively. (3)。 Inactivating proteins momordin, a:His, Tyr, Lys residues and COOH residues, 1,3.6,2.5 and 13 residues, 10, 10, 2.5 and 13% low, active and instigated.