二重特異性モノクロナ-ル抗体の作製
双特异性单克隆抗体的生产
基本信息
- 批准号:01570339
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1989
- 资助国家:日本
- 起止时间:1989 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
BALB/cマウスを、西洋ワサビのペルオキシダ-ゼ(HRP)、OM型赤血球、G3M G1型IgG3蛋白、G3M B3ST型IgG3蛋白またはG1M F型IgG1蛋白のF(ab')_2フラグメントで免疫しそのリンパ節細胞と同系マウスの骨髄腫細胞(P3U1)とをポリエチレングルコ-ルで融合させて培養し、クロ-ニングを行った。その結果、抗HRP、抗G3M G1、抗G3M Tおよび抗GIM Fモノクロナ-ル抗体を産生するハイブリド-マが得られた。二重特異性モノクロナ-ル抗体を作製するために、まず抗HRP産生ハイブリド-マと抗G3M T産生ハイブリド-マとを融合させて培養し、クロ-ニング後、酵素免疫測定法(ELISA)によって抗体スクリ-ニングを行った。すなわち、マイクロプレ-トをG3M T陽性のIgGでコ-トし、これを捕捉抗体としてHRPを捕捉させ、基質を加えて発色させた。三つの陽性ウェルのハイブリッドハイブリド-マを拡大培養し、同様にELISAによって抗体力価を測定したが、抗G3M Tが産生されているにもかかわらず抗HRPは検出されなかった。原因として、(1)抗HRP産生ハイブリド-マ自体に問題があった、(2)ハイブリッドハイブリド-マの拡大培養中に染色体が脱落した、(3)ハイブリッドになっていない抗G3M T抗体がハイブリッド抗G3M T/HRP抗体と競合し阻止抗体としてはたらいた、等の可能性が考えられた。原因を究明し、目的とするハイブリッドハイブリド-マの確立を急いでいる。
BALB/c
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yoshihiro TAMAKI,Tetsuko KISHIDA,Masako FUKUDA: "Practical method for production of monoclonal antibody to human IgG allotype G1M F and its applications in ELISAs and dot immunobinding" Journal of Immunological Methods.
Yoshihiro TAMAKI、Tetsuko KISHIDA、Masako FUKUDA:“生产人 IgG 同种异型 G1M F 单克隆抗体的实用方法及其在 ELISA 和点免疫结合中的应用”《免疫学方法杂志》。
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