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バクテロイデス・ジンジバリスの血清型別特異抗原の分離と性状

牙龈拟杆菌血清型特异性抗原的分离和特性

基本信息

批准号：
01571124
负责人：
佐藤誠
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01571124/
关键词：
バクテロイデス・ジンジバリス血清型特異抗原

项目摘要

バクテロイデス・ジンジバリス(B.gingivalis)のI〜IVの各血清型に属する代表的な菌株を用いて、各血清型特異抗原の抽出とその性状に関して検索を行った。特異抗原の抽出には、菌体を0.15M NaCl及び10mM MgCl_2加20mMトリス塩酸緩衝液(pH7.4)に懸濁、攪拌した後の上清を出発標品とした。その後、40%飽和硫安分画、n-Octyl-β-D-thioglucosideによる可溶化、さらにTSK-gel DEAE-5PWを用いて高速イオン交換クロマトグラフィ-を行い、0〜0.3MのNaClの直線濃度勾配で溶出してくる画分のうち、I〜IVの各血清型別吸収血清と沈降反応を示す画分を、各血清型別特異抗原として回収した。回収された特異抗原の性状に関して次のことが明らかになった。1.高速イオン交換クロマトグラフィ-の結果、血清型I型菌では0.16M、II型菌では0.19M、III型菌では0.21M、IV型菌では0.17MのNaCl濃度で、各血清型別吸収血清と反応する特異抗原画分が溶出された。2.特異抗原画分のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行ったところ、I型菌は98、86、54、38KD、II型菌は98、86、70、54KD、III型菌は70、54、41、37KD、IV型菌は86、70、55KDの部位にタン白質のバンドが認められ、各血清型別に異なった泳動パタ-ンがみられた。3.特異抗原画分には血球凝集活性は全く認められなかった。4.各菌体から別にリポ多糖体(LPS)の抽出を行い、今回得られた4種の特異抗原との異同を検討したところ、耐熱性や抗B.gingvalis血清に対する反応性の違いから、両者は全く異なることが認められた。

The strains represented by each serotype of I~IV (B.gingivalis) were used to extract the specific antigen of each serotype. After the extraction of specific antigen, 0.15m NaCl of bacteria and the supernatant of 10mM MgCl_2 plus 20mM and pH7.4, the standard product was obtained. After treatment, 40% and thioampere were extracted, naphthyl-β-D-thioglucoside was dissolved, TSK-gel DEAE-5PW was used at high speed to communicate with thioampere, 0,3m NaCl, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3M, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3m, 0. 3M, 0. 3m, 0. 3m, In response to the specific antigen, the characteristics of the antigen were not detected in the first place. 1. The results showed that serotype I was 0.16m, serotype II was 0.19m, type III was 0.21m, type IV was 0.17m NaCl, serotype I was 0.16m, serotype II was 0.19m, type III was 0.21m. two。 The specific antigens were divided into four parts: SDS-, type I bacteria 98, 86, 54, 38KD, type II bacteria 98, 86, 70, 54KD, type III bacteria 70, 54, 41, 37KD, type IV bacteria 86, 70, 70, 55KD, all serotypes were tested, and all serotypes were tested. 3. Special antigen painting score: hemagglutination activity, hemagglutination activity, hemagglutination activity. 4. The bacteria were isolated from different polysaccharides (LPS), and this time, the specific antigens were identical, the anti-B.gingvalis sera were stable, the anti-polysaccharides were negative, and the whole samples were isolated.