超级信号肽的开发及其在有用蛋白质的分泌生产中的应用-猫眼课题宝

超级信号肽的开发及其在有用蛋白质的分泌生产中的应用

批准号：

02558018

负责人：

水島昭二

金额：

$8.06万

依托单位：

The University of Tokyo

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)

财政年份：

1990

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1990 至 1992

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02558018/

关键词：

タンパク質の分泌シグナルペプチドスーパーシグナルペプチドシグナルペプチド正荷電域シグナルペプチド疎水域人工シグナルペプチド大腸菌タンパク質の膜透過ス-パ-シグナルペプチド

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项目成果

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モデルタンパク質RroOmpF-Lppの誘導体を用いて以下の研究成果を挙げた。1.シグナルペプチドの中央疎水領域の役割:〔Leu〕n系列を用いて、全疎水性が強くなると、膜酸性リン脂質要求性が弱くなること、また酸性リン脂質と強く結合する薬剤(Doxorubicin,Polylysine)による膜透過能の阻害が見られることを明らかにした。2.中央疎水領域とN末端正荷電領域の機能の関連性:〔AlaLeu〕n系列においても、疎水度が高くなるとN末端正荷電要求性が低くなることを明らかにした。N末端正荷電がないと高濃度のSecAを要求すること、それは正荷電がSecAに対する分泌型タンパク質の高い親和性に関与しているためであることも明らかにした。またこれらの研究より、タンパク質の膜透過では、まず細胞質中のSecAが分泌型タンパク質を認識し、しかる後に膜上の分泌装置へと運搬するとの機構が強く示唆された。3.C末端領域の構造と機能の関連性:C末端領域についての直接の情報は得られなかったが、C末端に続く成熟型N末端のコンホメーションが細胞質膜透過とともに、外膜透過にも重要な役割を果していることを明らかにすることができた。4.In vitro実験系を用いての解析:疎水領域が長くなるとN末端正荷電がなくても膜透過しうることを、in vitroでも示すことができた。一方、応用上注目すべきシグナルペプチドを作成するまでには至らなかった。

期刊论文(22)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

C.Hikita.et al.: "Effects of total-hydrophobicity and length of the hydrophobic domain of a signal peptide on in vitro translocation efficiency." J.Biol.Chem.267. 4882-4888 (1992)

C.Hikita.et al.：“信号肽疏水结构域的总疏水性和长度对体外易位效率的影响。”

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Matsuyama,S.,Kimura,E.and Mizushima,S.: "Complementation of two overlapping fragments of SecA,a protein translocation ATPase of <Escherichia>___ー <coli>___ー,allows ATP binding to its aminoーterminal region." J.Biol.Chem.265. 8760-8765 (1990)

Matsuyama, S.、Kimura, E. 和 Mizushima, S.：“SecA 的两个重叠片段的互补，SecA 是<埃希氏菌>___— <大肠杆菌>___— 的蛋白质易位 ATP 酶，允许 ATP 与其氨基末端区域结合” J.Biol.Chem.265.8760-8765 (1990)

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

M.Kato et al.: "In Vitro translocation of secretory proteins possessing no charges at the mature domain takes place efficiently in a protonmotive force-dependent manner." J.Biol.Chem.267. 413-418 (1992)

M.Kato 等人：“成熟结构域不带电荷的分泌蛋白的体外易位以质子动力依赖性方式有效发生。”

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Shiozuka,K.,Tani,K.,Mizushima,S.and Tokuda,H.: "The proton motive force lowers the level of ATP required for the <in>___ー <vitro>___ー translocation of a secretory protein in <Escherichia>___ー <coli>___ー." J.Biol.Chem.265. 18843-18847 (1990)

Shiozuka, K.、Tani, K.、Mizushima, S. 和 Tokuda, H.：“质子动力降低了分泌蛋白 <in>_____ <vitro>_____ 易位所需的 ATP 水平<埃希氏菌>___ー <大肠杆菌>____。” J.Biol.Chem.265. 18843-18847 (1990)

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

C.Hikita et al.: "The requirement of a positive charge at the amino terminus can be compensated for by a longercentral hydrophobic stretch in the functioning of signal peptides." J.Biol.Chem.267. 12375-12379 (1992)

C.Hikita 等人：“氨基末端正电荷的要求可以通过信号肽功能中较长的中心疏水性延伸来补偿。”

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

共 21 条

大腸菌蛋白質分泌の分子機構

批准号：

04259102
项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
资助金额：

$31.55万
财政年份：

1992
负责人：

水島昭二
依托单位：

Tokyo University of Pharmacy and Life Science (1993)The University of Tokyo (1992)