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タンパク質の膜透過・分泌の機構

蛋白质膜渗透和分泌机制

基本信息

批准号：
61060001
负责人：
水島昭二
金额：
$ 69.76万
依托单位：
The University of Tokyo (1988-1989)Nagoya University (1986-1987)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Specially Promoted Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至 1989
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61060001/
关键词：
タンパク質の分泌タンパク質の膜透過 SecA ATP シグナルペプチド大腸菌ビブリオ菌膜タンパク質タンパク質膜透過のin vitro系タンパク質膜透過のエネルギー要求性バイオエナジエティックス SecAタンパク質シグナルペプチターゼシグナルペプチドペプチダーゼタンパク質の膜透過のエネルギー要求性バイオエナジェティックスプロテアーゼ【IV】

项目摘要

1)膜透過に関与する因子の機能解析:精製SecAおよびSecA断片を用いて、ATPとの相互作用、分泌型タンパク質との相互作用におけるSecAの各ドメインの役割を明らかにした。またSecAが二量体を形成していることを明らかにした。2)膜透過過程の反応速度論的解析:1分子の分泌型タンパク質が膜を通過する過程を解析する目的で、繰返し構造をもつ巨大人工タンパク質をコードする人工遺伝子を作成した。しかし、in vitroで効率よく膜透過させることには成功していない。3)膜透過反応へのエネルギーの関与:ATPがSecAのN末近くと相互作用することを明らかにした。またΔμ^^ーH^+はATPの分泌装置(恐らくはその中のSecA分子)に対する親和性を高める働きをしていることを明らかにした。4)分泌型タンパク質の構造と膜透過性:シグナルペプチドのN末端正荷電の重要性を明らかにした。また中央部疎水領域の特性、同領域とN末端領域が機能的に関連しあっていることを、人工シグナルペプチドを用いて明らかにした。5)タンパク質と膜との相互作用:シグナルペプチドの膜内配向性についての研究成果をもとに、膜タンパク質の膜内配向性を決定する因子として、疎水領域とそれに隣接する正荷電の組合せが重要であることを、in vitro実験によって示した。6)再構成系を用いての解析:膜透過再構成系の作成に成功した。リン脂質、膜構造、膜タンパク質、SecY、SecA、ATPが必要なことを再構成系で示すことに成功した。7)ビブリオ菌でのin vitro膜透過系をつくることに成功し、この細菌特有のNa^+ポンプが膜透過に関与することを示した。

1) Functional Analysis of Membrane Permeability and Factors: Purified SecA Fragments and ATP Fragments Interaction, secretion type タンパク性とのInteraction におけるSecAのeach ドメインのservice cut を明らかにした.またSecAがtwo-dimensional bodyをformationしていることを明らかにした. 2) Analysis of reaction rate theory of membrane permeation process: solution of secretion-type membrane permeation process of 1 molecule Analysis of the purpose of the analysis, the structure of the return of the huge artificial タンパクquality をコードするartificial remains 伝子を was made. The efficiency of in vitro and membrane permeation was achieved by using the membrane successfully. 3) The membrane passes through the reaction membrane and interacts with ATP and SecA.またΔμ^^ーH^+はATPのsecretion device (phobic らくはその中のSec A molecule) has high affinity and high affinity. 4) The structure and membrane permeability of the secreted protein: the importance of positive charge at the N-terminal of the secreted protein. The characteristics of the central part of the water field, the function of the same field and the function of the N-terminal field are related to the functions of the artificial water field. 5) Material and membrane interaction: research results on the alignment of the membrane within the membrane, をもとに, membrane membrane The alignment factor within the plasma membrane determines the alignment factor. vitro実験によってshowsした. 6) Analysis of the use of the reconstruction system: The success of the membrane permeation reconstruction system was achieved. Lipids, membrane structure, membrane lipids, SecY, SecA, and ATP are necessary to reconstruct the system and show success. 7) The in vitro membrane permeability system of ビブリオ bacteria is successful, and the このbacteria-specific のNa^+ ポンプが membrane permeation system is successful and the することをshow is successful.