心筋ミオシン重鎖及び軽鎖遺伝子の転写制御機構の解析
心肌肌球蛋白重链、轻链基因转录调控机制分析
基本信息
- 批准号:02670382
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1990
- 资助国家:日本
- 起止时间:1990 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
負荷によりその発現が亢進する心室筋ミオシン重鎖及び軽鎖遺伝子をヒト遺伝子ライブラリ-からクロ-ニングし,その発現調節を行うプロモ-タ-領域の機能解析をCATアッセイ法を用いて検討した.ヒト心室筋ミオシン軽鎖I(VLCI)遺伝子のプロモ-タ-領域には,遺伝子の発現に働く数多くの,特徴的な塩基配列が存在していた.TATAで示される転写開始を規定するTATAbox,さらに上流にはCATbox,GCboxなどの特異的な塩基配列が存在し,転写活性を促進する機能を行っていた.筋肉細胞に特有の遺伝子発現に必要なCAγGboxも存在していた.一方,VLCI遺伝子の転写活性は,細胞レベルの検討により,機械的刺激,TPA,フォルスコリンで亢進されることが示されている.すなわち,Cキナ-ゼ,Aキナ-ゼの活性化によりVLCIの遺伝子転写が活性化されるわけである.そこで,プロモ-タ-領域でこの反応に必要な塩基配列を決定するために,プロモ-タ-領域を順次欠落する変異株を用いて検討すると,転写開始部位より上流57塩基と46塩業の間のわずかな部位に存在しており,その塩基配列を検討すると,Aキナ-ゼともCキナ-ゼとも反応するAP2蛋白が結合する特有の塩基配列の存在することが新たに判明した.すなわち,Ap2蛋白はAキナ-ゼによってもCキナ-ゼによっても反応してリン酸化され,これが対応するVLCI遺伝子のプロモ-タ-領域に結合してその転写活性を促進することが明らかとなった.このことは,機械的刺激,カテコラミン,アンジオテンシンIIなどにより蛋白リン酸化酵素が活性化された時に起こる遺伝子の発現機序を直接究明したことにより,心肥大形成の生化学的機序を解明する新たな展開が得られるところとなった.そして細胞レベルで問題となった心肥大のシグナリングとしては,Cキナ-ゼもAキナ-ゼも遺伝子発現調節に関与していることが示された.
Load に よ り そ の 発 now が hyperthyroidism す る ventricular muscle ミ オ シ ン heavy lock and び 軽 lock heritage 伝 son を ヒ ト posthumous son 伝 ラ イ ブ ラ リ - か ら ク ロ - ニ ン グ し, そ の 発 now line adjustment を う プ ロ モ の function - タ - field analytical を CAT ア ッ セ を イ method with い て beg し 検 た. ヒ ト ventricular muscle ミ オ シ ン 軽 I lock (VLCI) heritage 伝 son の プ ロ モ タ - Field に は, but son 伝 の 発 now に 働 く more く の, of 徴 な salt base with column が exist し て い た. TATA で shown さ れ る planning to write started を stated す る TATAbox, さ ら に upper に は CATbox, GCbox な ど の specific な salt base with column し が, planning to write activity を promote す る line function を っ て い た. Muscle and muscle cells に unique cultural heritage 伝 offspring occur に necessary なCAγGbox に exists <s:1> て た た た Son, VLCI heritage 伝 の は planning write activity, cell レ ベ ル の beg に 検 よ り, mechanical stimuli, TPA, フ ォ ル ス コ リ ン で hyperthyroidism さ れ る こ と が shown さ れ て い る. す な わ ち, C キ ナ - ゼ, A キ ナ - ゼ の activeness に よ り VLCI の heritage 伝 son planning write が activeness さ れ る わ け で あ る. そ こ で, プ ロ モ - タ - field で こ の anti 応 に necessary な salt base with column を decided す る た め に, プ ロ モ タ - field を progressive owe fall す る - different strains を with い て beg す 検 る と, planning to write start parts よ り between upper 57 salt base と 46 salt industry の の わ ず か に な parts exist し て お り, そ の salt base with column を beg す 検 る と, A キ ナ - ゼ と も C キ ナ - ゼ と も anti 応 す る AP2 Protein が combining す る の special salt base with column の is す る こ と が new た に.at し た. す な わ ち, Ap2 proteins は A キ ナ - ゼ に よ っ て も C キ ナ - ゼ に よ っ て も anti 応 し て リ ン acidification さ れ, こ れ が 応 seaborne す る VLCI heritage 伝 son の プ ロ モ に タ - field combining し て そ の planning write activity を promote す る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の こ と は, mechanical stimuli, カ テ コ ラ ミ ン, ア ン ジ オ テ ン シ ン II な ど に よ り protein リ ン が acidification enzyme activeness さ れ た に up こ る posthumous son 伝 の 発 now machine sequence を directly investigate Ming し た こ と に よ り, heart hypertrophy の machine sequence of biochemical を interpret す る new た な expand が must ら れ る と こ ろ と な っ た. そ し て cells レ ベ ル で problem と な っ た heart hypertrophy の シ グ ナ リ ン グ と し て は, C キ ナ - ゼ も A キ ナ - ゼ も heritage 伝 son 発 now adjust に masato and し て い る こ と が shown さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Y.Seko,etc: "Expression of major histocompatibility complex class I antigen in murine ventricular myocytes infected with coxsackievirus B3." Circ.Res.67(2). 360-367 (1990)
Y.Seko等:“感染柯萨奇病毒B3的小鼠心室肌细胞中主要组织相容性复合物I类抗原的表达”。
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M.kurabayashi,etc: "Functional identification of the transcriptional regulatory elements within the promoter region of the human ventricular myosin alkali light chain gene." J.Biol.Chem.265(31). 19271-19278 (1990)
M.kurabayashi等:“人心室肌球蛋白碱轻链基因启动子区内转录调控元件的功能鉴定”。
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
I.Komuro,etc: "Stretching of cardiac myocytes stimulates protooncogene expression." J.Biol.Chem.265(7). 3595-3598 (1990)
I.Komuro等:“心肌细胞的拉伸刺激原癌基因的表达。”
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- 发表时间:
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- 作者:
- 通讯作者:
T.Sugiyama,etc: "Cytoplasmic calcium ion elevating factor(s) in spontaneously hypertensive rat serum." J.Hypertension. 8(10). 919-925 (1990)
T.Sugiyama等:“自发性高血压大鼠血清中的细胞质钙离子升高因子”。
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- 发表时间:
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- 作者:
- 通讯作者:
I.Komuro,etc: "Molecular cloning of gene sequences from rat heart rapidly responsive to pressure overload." Circ.Res.66(4). 979-985 (1990)
I.Komuro等:“对压力超负荷快速反应的大鼠心脏基因序列进行分子克隆。”
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