細胞刺激にともなうリポコルチンの分子修飾反応の解析

细胞刺激后脂皮质素分子修饰反应的分析

• 批准号: 02680131
• 负责人: 神奈木 玲児
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02680131/
• 关键词: リポコルチン; トランスグルタミナ-ゼ; EGF(上皮細胞成長因子); カルシウムイオン; カルパイン; 培養癌細胞

リポコルチンはステロイドによって誘導される抗炎症性蛋白質として記載された、カルシウム依存性に細胞膜あるいはリン脂質膜に結合する一連の蛋白質の総称である。我々は、リポコルチンのカルシウム感受性が、そのN末端部分を修飾(架橋および限定分解)することによって著しく高められることを見出した。特に架橋反応の効果が著しい。今年度の研究によって、適切な条件下でリポコルチンIにトランスグルタミナ-ゼを反応させると、架橋反応の結果、リポコルチンIの2量体,4量体,6量体‥‥にあたる分子量をもつ産物が生ずることが明らかとなった。形成された架橋リポコルチンIと酸性リン脂質との結合はたいへん強固であり、50%結合に必要なCa^<2+>濃度は3μMと算定された。すなわち、intactリポコルチンI,リン酸化リポコルチンI,限定分解リポコルチンIのいずれよりも低濃度のCa^<2+>により、十分に酸性リン脂質に結合する活性を有する。また、リポコルチンIを多量に含むことが判明しているヒト扁平上皮癌細胞株A431細胞をEGFで刺激すると、架橋反応によって生じると考えられる74kDaのリポコルチンI2量体と、加水分解反応の結果と考えられる34kDaのリポコルチンIが、EGF刺激の強さに比例して出現するのが観察される。すなわち、リポコルチンIの架橋や加水分解反応は、in vitroで精製リポコルチンIに精製酵素を加えた実験のみならず、生理的条件下の細胞内でもin situに観察されることが明らかとなった。さらに、in vitroで精製リポコルチンIをトランスグルタミナ-ゼによって架橋する際に、酸性リン脂質を加えると架橋反応が著しく促進することを見出した。刺激をうけた細胞においては、リポコルチンIが細胞膜に結合し、その後細胞内トランスグルタミナ-ゼによって架橋反応をうけるものと考えられた。

Anti-inflammatory proteins that can be induced by lipid membrane binding are described in detail below. The N-terminal part of the protein is modified by the enzyme. Special bridge effect is very important. This year's research has been carried out under appropriate conditions, and the results of bridging reaction have been obtained. The formation of a bridge between the acid and the lipid is determined by the concentration of Ca^<2+> 3μM. The activity of Ca^<2+>, Ca^<2+>, Ca ^ The results of EGF stimulation and bridging reactions in squamous cell carcinoma cell line A431 were observed. In vitro, in vivo, in In addition, in the vitro, it is possible to improve the quality of the products by adding acidic lipids to the products. The cell membrane is bound to the cell membrane by the stimulus, and the cell membrane is bound by the stimulus.

项目成果

Ando,Y.,Imamura,S.,and Kannagi,R.: "Human epidermis contains coagulation factor XIII." Arch.Dermatol.Res.282. 656-667 (1990)

Ando,Y.、Imamura,S. 和 Kannagi,R.：“人类表皮含有凝血因子 XIII。”

Ando,Y.,Imamura,S.,Owada.,M.K.,and Kannagi,R.: "Calciumーinduced intracellular crossーlinking of lipocortion I by tissue transglutaminase in A431 cells:Augmentation by membrane phospholipids." J.Biol.Chem.

Ando, Y.、Imamura, S.、Owada.、M.K. 和 Kannagi, R.：“A431 细胞中组织转谷氨酰胺酶引起的钙诱导的脂皮质交联 I：膜磷脂的增强作用”。 .化学。

Murachi,T.,Adachi,Y.,Hatanaka,M.,Ishihara,G.,Takano,E.,Yamagata,Y.,Kannagi,R.: "In"Isozymes:Structure,Function,and Use in Biology and Medicine",Gene expression for calpain for calpain isozymes in human hematopoietic system" WileyーLiss,Inc., 18(477-494) (1

Murachi, T.、Adachi, Y.、Hatanaka, M.、Ishihara, G.、Takano, E.、Yamagata, Y.、Kannagi, R.：“In”同工酶：结构、功能及其在生物学和医学中的用途“人类造血系统中钙蛋白酶同工酶的基因表达”Wiley-Liss, Inc., 18(477-494) (1.

安藤 佳洋,上田 路子,神奈木 玲児.: "「リポコルチンによる脂質代謝の制御」" 生体防御. 8.

Yoshihiro Ando、Michiko Ueda、Reiji Kanagi.：“‘脂皮质素控制脂质代谢’”Biodefense 8。

安藤 佳洋,今村 貞夫,神奈木 玲児,大和田 幸嗣: "「カルシウム刺激にともなう細胞内リポコルチンIのトランスグルタミナ-ゼによる架橋反応」" 脂質生化学研究. 32. 245-248 (1990)

Yoshihiro Ando、​​Sadao Imamura、Reiji Kanagi、Yukitsugu Owada：“‘钙刺激下转谷氨酰胺酶对细胞内脂皮质素 I 的交联反应’”脂质生物化学研究 32. 245-248 (1990)。