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血管障害における細胞接着分子セレクチンとリガンド糖鎖の関与についての研究

细胞粘附分子选择素和配体糖链参与血管疾病的研究

基本信息

批准号：
10177234
负责人：
神奈木玲児
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

動脈硬化性病変の発生に、セレクチンと糖鎖を介する細胞接着が関与することが示唆されている。我々は昨年、ヒトリンパ節高血管内皮細静脈HEV血管内皮細胞上のL-セレクチンリガンドが、6-スルホシアリルルイスxであることを、特異抗体の作成を通じて証明した。6-スルホシアリルルイスx糖鎖は、その構造から見て、フコシルトランスフエラーゼとスルホトランスフェラーゼによって合成されると考えられる。そこで今回、この両酵素の遺伝子をリガンド活性のない培養血管内皮細胞株に導入して、L-セレクチンリガンドの再構成を試みた。すなわち、以前YT細胞から得られたフコシルトランスフェラーゼVII(Fuc-TVII)と今回新たにクローニングされたGlcNAcβ:6-スルホトランスフェラーゼ(6-Sul-T)を、ヒトHUVEC由来のヒト血管内皮細胞株ECV304に単独または二重に導入して、フローサイトメトリーと細胞接着実験にてシアリル6-スルホルイスxの発現とL-セレクチン陽性細胞の接着能を検索した。フローサイトメトリーの結果、ECV304細胞の糖転移酵素トランスフェクタントのうち、シアリルルイスxは、Fuc-TVII強制発現クローンおよびFuc-TVII・6-Sul-Tの二重強制発現細胞に検出された。シアリル6-スルホラクトサミンは、6-Sul-T強制発現細胞およびFuc-TVII・6-Sml-Tの二重強制発現細胞に検出されたシアリル6-スルホルイスxは、Fuc-TVII・6-Sul-Tの二重強制発現細胞にのみ検出された。細胞接着実験の結果、L-セレクチン発現細胞は、この4種の細胞のうち、Fuc-TVII・6-Sul-Tの二重強制発現細胞にのみ接着した。この接着は、抗L-セレクチン抗体で完全に阻害され、抗シアリル6-スルホルイスx抗体で強く阻害された。これにより、リンパ節の高血管内皮細胞に発現されるL-セレクチンリガンド糖鎖6-スルホシアリルルイスxは、フコシルトランスフェラーゼ(Fuc一TVII)と6-スルホトランスフエラーゼ(6-Sul-T)を二重にトランスフェクトすることによって再構成できることが証明された。

Animal sclerosing sexually transmitted diseases (STDs) are known to be unhygienic and instigated by the introduction of sugar. Last year, we reported that the cells of vascular endotheliocytes with high levels of endothelium (HEV) and endothelium of blood vessels (VECs) were infected with L-phenotype, 6-phenotype, antigens and specific antibodies. 6-No, no, no. This time, the cell line of vascular endothelium was cultured in vitro, and the cell line of vascular endothelium was cultured and then formed into an experimental cell. In the past, the YT cell line, the cell line ECV304, the vascular endothelial cell line, the single cell line, the endothelial cell line, the vascular endothelial cell line, the I don't know. I don't know. The results are as follows: ECV304 cell glucose transfer enzyme, enzyme transfer enzyme, glucose transfer enzyme, enzyme transfer enzyme, glucose transfer enzyme, glucose transfer enzyme, The double stress of Fuc- TVII ·6-Sml-T, Fuc- TVII. 6-Sul-T, Fuc- TVII. 6-cell, and Fuc- TVII. 6-cell. The cell then examines the results, L-cell, four cell types, and Fuc- TVII ·6-Sul-T double stress to detect the cell cycle. Then, anti-L-virus antibody completely blocked the virus, and anti-virus 6-antibody strongly blocked the antibody. The high vascular endothelial cells showed that there was a high level of blood vessel endothelialization in the blood vessels. The sugar was 6-fold, the glucose was 6-fold, the TVII was 6-fold, the blood pressure was 6-fold, the TVII was 6-fold, the weight was 6-fold, the cell weight was 6-Sul-T, and then the blood sugar was changed.