Vergleichende Analyse und funktionelle Charakterisierung der Promoterregionen der Smad7 Gene von Ratte, Maus und Mensch

大鼠、小鼠和人 Smad7 基因启动子区的比较分析和功能表征

基本信息

项目摘要

Smad7, ein kürzlich identifizierter Antagonist der TGFß-Signaltransduktion, inhibiert TGFß-induzierte Transkriptionsaktivität durch Interaktion mit der Aktivierung der Signalübermittler, Smad2 und Smad3. Die Aktivierung von Smad7 erfolgt hauptsächlich durch Transkriptionsinduktion mit einer Zeitkinetik, die der von "early response"-Genen entspricht. TGFß selbst kann die Smad7 Expression in Form einer negativen "feed back"-Regulation induzieren. Weitere Signalkaskaden, welche durch IFNg oder EGF eingeschaltet werden, sind ebenfalls in der Lage die Transkription des Gens zu aktivieren. Genregulatorische Sequenzen der Smad7-Gene waren bisher unbekannt. Uns gelang nun die Charakterisierung des genomischen Lokus und der Promotor-Region des Smad7 Gens der Ratte sowie die Klonierung der entsprechenden Promotor-Regionen von Maus und Mensch. Gegenstand des vorliegenden Antrags ist die funktionelle Charakterisierung der Promotor-Region, in Abhängigkeit der Transkriptionsstimulation durch TGFß, IFNg oder EGF. Hierfür sollen Transfektionsexperimente mit Promotor-Reportergen-Konstrukten eingesetzt werden. Die bei der Transkriptionsaktivierung beteiligten Sequenzen und die Zusammensetzung der bindenden Komplexe sollen durch EMSA und gegebenenfalls footprint-Experimente identifiziert werden. Insbesondere soll die zwischen Mensch, Maus und Ratte hochkonservierte Region um das SMAD Binding Element (SBE oder CAGABox) genau untersucht werden.
Smad 7是TGF β-信号转导的一种拮抗剂,通过信号转导的激活作用,Smad 2和Smad 3的相互作用抑制TGF β-诱导的转录活性。Smad 7的积极性主要是通过一种时代动力学的transkriptionsinduktion来实现的,这是“早期反应”的结果。TGF β自身可以形成一种负反馈调节的Smad 7表达。无论是通过IFNg还是EGF的韦尔登作用,都能有效地促进拉格基因的转录。Smad 7基因的遗传调控测序是不合理的。因此,我们可以从人类基因组学的角度来探讨小七代的基因组学特征和启动子区的特征。肿瘤的发生是启动子区的功能特征,通过TGF β、IFNg或EGF的跨膜刺激。Hierfür sollen Transfektionsexperimente mit Promotor-Reportergen-Konstrukten eingesetzt韦尔登。通过EMSA和韦尔登识别足迹,对结合复合物进行测序和选择。因此,我们可以使用SMAD绑定元素(SBE或CAGABox)来创建两个Mensch、Maus和Ratte hochkonservierte区域,以供韦尔登使用。

项目成果

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Professor Dr. Steven Dooley, Ph.D.其他文献

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