Smad-abhängige TGF-beta-Signaltransduktion während physiologischer und pathobiochemischer Prozesse der Fibrogenese und Geweberegeneration in der Leber: Untersuchungen mit transgenen Smad7 und Smad7/3-knock out Tieren

肝脏纤维形成和组织再生的生理和病理生化过程中 Smad 依赖性 TGF-β 信号转导：转基因 Smad7 和 Smad7/3 敲除动物的研究

• 批准号: 12713473
• 负责人: Professor Dr. Steven Dooley, Ph.D.
• 金额: --
• 依托单位: II. Medizinische Klinik: Gastroenterologie, Hepatologie, Infektiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/12713473?language=en
• 关键词: Smad; abh; ngige; TGF; beta

Chronische Schädigung der Leber durch Hepatitis B- oder C-Viren, Alkohol oder andere Noxen stellt weltweit ein erhebliches sozioökonomisches Problem dar. Organschützende Wundheilungsmechanismen werden durch Zytokine und andere Mediatoren induziert, was bei chronischer Aktivierung zur Transdifferenzierung und Proliferation hepatischer Sternzellen (HSC) und zur Apoptose von Hepatozyten mit Verlust der normalen Leberarchitektur führt. Neben der Fibrosierung und Zirrhoseentstehung tritt in vielen Fällen ein hepatozelluläres Karzinom auf. Hierbei könnte ein gemeinsamer Pathomechanismus zugrundeliegen. TGF-ß ist ein bedeutsames profibrogenes Zytokin und bereits die undifferenzierte Blockade des TGF-ß-Signalwegs führt bei induzierter Leberfibrose im Tiermodell, unabhängig davon, ob die Schädigung durch Gallengangsligatur, CCI4 oder Dimethylnitrosamin verursacht wurde, zu einer Verbesserung des Organzustands. In eigenen Vorarbeiten wurde durch spezifische Expression des TGF-ß-Antagonisten Smad7 in der Leber als gentherapeutischer Ansatz mittels adenoviraler Infektion von Ratten nach Gallengangsligatur die Fibrogenese signifikant unterdrückt. Zellbiologische Untersuchungen zeigten, dass die ektopische Expression von Smad7 den Transdifferenzierungsprozess der hepatischen Sternzellen blockiert. Durch die Verwendung eines CMV-Promotors als genregulatorisches Element erfolgte bei dieser in vivo-Gentherapie die Expression des Transgens in verschiedenen Zelltypen der Leber gleichermaßen. Zur Analyse der zelltypspezifischen Wirkung der Smad7 Expression wurden deshalb transgene Mauslinien erzeugt, die Smad7 spezifisch in Hepatozyten exprimieren unter der Kontrolle des CRP-Promotors, der während einer Akut-Phase-Reaktion aktiviert wird, bzw. reguliert durch einen konditionierten CRE-Rekombinase abhängigen Albumin- Promotor. Nach Induktion einer Fibrose durch CCI4-Behandlung soll aufgeklärt werden, wie sich die Überexpression von Smad7 auf die TGF-ß-abhängige Apoptose und die Fibrogenese auswirkt. TGF-ß besitzt darüberhinaus eine wichtige regulatorische Rolle bei der Leberregeneration. Deshalb erwarten wir, dass die Induktion der Smad7-Expression speziell in Hepatozyten möglicherweise den Regenerationsprozess beschleunigt, jedoch auch die Gefahr eines unkontrollierten Proliferationsverhaltens beinhaltet. Dies soll nach 50%iger Hepatektomie im Vergleich mit Wildtyptieren bestimmt werden. Komplementiert werden die Resultate durch Untersuchungen an Smad7- bzw. Smad3-knock out-Mäusen. Wir erwarten durch das beantragte Projekt spezifische neue Details zur Funktion des multipotententen Zytokins TGF-ß bei Fibrogenese- und Regenerationsprozessen aufzuklären, die es ermöglichen werden, die Konzeption anti-TGF-ß ausgerichteter Therapieansätze weiter zu fokussieren und dazu beitragen sollen, unerwünschte Nebenwirkungen auszuschließen.

慢性B肝炎或丙型肝炎、酒精或诺克斯中毒导致的肝功能损害是一个严重的社会经济问题。通过Zytokine和Mediatoren induziert建立器官功能韦尔登机制，是通过观察正常肝脏结构的肝细胞转化分化和增殖（HSC）以及肝细胞凋亡的时间表。Neben der Fibrosierung und Zirrhoseentstehung tritt in vielen Fällen ein hepatozelluläres Karzinom auf.这里有一个共同的病理机制。TGF-β抑制剂是一种促纤维化因子Zytokin，其作用是通过诱导肝纤维化来阻断TGF-β-Signalwegs，通过Gallengangsligatur、CCI 4或二甲基亚硝胺进行消化，从而抑制组织的分化。在本研究中，TGF-β-拮抗剂Smad 7在肝细胞中的特异性表达可显著抑制腺病毒感染大鼠肝纤维化。Zellbiologische Untersuchungen zeigten，dass the ektopische Expression von Smad7 den transdifferentizierungsprozess der hepatischen Sternzellen blockiert.通过体内基因治疗来表达CMV-Promotors als genregulatorisches Element erfolgte bei dieser-Gentherapie die Expression des Transgens in verschiedenen Zelltypen der Leber gleichermaßen。通过对Smad 7基因表达谱的分析，发现在CRP启动子调控下，Smad 7基因在肝癌细胞中的表达，可以使肝癌细胞的急性期反应活跃起来。通过一种条件性CRE-Rekombinase abhängigen Albumin- Promotor调节。CCI 4处理后诱导纤维化可使Smad 7的表达增加韦尔登，如TGF-β抑制凋亡和纤维化。TGF-β在肝再生中具有重要的调节作用。因此，在再生过程中，Smad 7表达特异性在肝细胞中的诱导作用是非常重要的，但也可能是一种不受控制的过度表达。50%的肝切除术后死亡，其中野生型韦尔登。通过对Smad 7- bzw的研究，完成了结果的韦尔登。Smad 3-击倒-Mäusen。我们通过这一特殊的新项目详细介绍了多能转化生长因子-β 2在促纤维化和再生过程中的作用，这些作用是韦尔登，抗转化生长因子-β 2受体的抗肿瘤治疗也是聚焦和聚焦，从而促进新生儿的生长。