Aufklärung der Geruchsstoffspezifität olfaktorischer Rezeptoren und Rezeptorsubfamilien durch funktionelle Expression einer Rezeptorbibliothek im Säugerzellsystem

通过哺乳动物细胞系统中受体库的功能表达阐明嗅觉受体和受体亚家族的气味特异性

基本信息

项目摘要

Die noch wenig verstandene Kombinatorik der Geruchsstoffspezifitäten olfaktorischer Rezeptoren erfordert praktikabel angelegte Screeningsysteme, die es ermöglichen, tausende Geruchsstoffe gegen hunderte, zum großen Teil noch unbekannte, olfaktorische Rezeptoren auszutesten. Die Existenz einer komplexen Expressionsplasmid-Bibliothek olfaktorischer Rezeptorchimären der Maus (_300) ermöglicht die gezielte funktionelle Analyse einer Vielzahl zum Teil hoch homologer olfaktorischer Rezeptoren. 1. Die Expression dieser Rezeptoren in Säugerzelllinien und Versuche zu deren Aktivierung durch Geruchsstoffe mit der Ca2+-imaging-Methode ermöglicht die Entdeckung neuer Geruchsstoff-Rezeptor-Kombinationen. 2. Die Untersuchung zonaler Expressionsmuster funktionaler olfaktorischer Rezeptoren durch in-situ-Hibridisierung soll zur funktionellen Kartierung des olfaktorischen Epithels beitragen. 3. Durch Sequenzvergleiche olfaktorischer Rezeptoren, Mutationsanalysen und Bestimmung von Geruchsstoffspezifitäten in Ca2+-imaging-Experimenten sollen schließlich einzelne Aminosäuren identifiziert werden, die direkt an einer Geruchsstoffbindung beteiligt sind. Dies soll zu einem besseren Verständnis der Kombinatorik von Geruchsstoffspezifitäten, und letztlich zur Aufklärung von Struktur-Wirkungsbeziehungen olfaktorischer Rezeptoren führen.
Die noch wenig verstandene Kombinatorik der Geruchsstoffspezifitäten olfaktorischer Rezeptoren erfordert praktikabel angelegte Screeningsysteme,die es ermöglichen,tauschsstoffe gegen hunderte,zum großen Teil noch unkannte,olfaktorische Rezeptoren auszutesten. Die plastenz einer komplexen Expressionsplasmid-Bibliothek olfaktorischer Rezeptorchimären der Maus(_300)ermöglicht die gezielte funktionelle Analyse einer Vielzahl zum Teil hoch homologer olfaktorischer Rezeptoren. 1.通过Ca 2 +-成像-方法确定新的Geruchsstoff-Rezeptor-Kombinationen检测试剂盒,在Säugerzelllinien和Versuche中表达Rezeptoren。2.通过原位-Hibridisierung soll zur funktionellen Kartierung des olfaktorischen Epithels beitragen,对区域表达进行了研究。3.在钙离子成像实验中,通过对DNA序列的分析、突变的分析和对DNA特异性的评估,确定了一种直接的DNA结合位点。Dies soll zu einem besseren Verständnis der Kombinatorik von Geruchsstoffspezifitäten,und letztlich zur Aufklärung von Struktur-Wirkungsbeziehungen olfaktorischer Rezeptoren führen.

项目成果

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Privatdozent Dr. Dietmar Krautwurst其他文献

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