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肝硬変をモデルとした前癌病変に関わる遺伝子のクロ-ニングとその診断への応用

肝硬化模型癌前病变相关基因的克隆及其在诊断中的应用

基本信息

批准号：
03670164
负责人：
江角真理子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1、サブトラクション法による肝硬変特異的遺伝子のクロ-ニング現在、尚進行中である。2.αーフェトプロテイン発現制御蛋白の遺伝子クロ-ニングαーフェトプロテインの発現制御領域の中で最も促進効果の高い領域として、転写因子HNFー1結合部位が報告されている。HNFー1は肝特異的なmRNAに共通な転写因子として、正常肝にもともと存在するものであるが、最近ラットで癌化に伴いそのvariant formの存在することが報告された。そこで、αーフェトプロテイン産生肝細胞癌HepG2を用いて、ヒトHNFー1variantの遺伝子クロ-ニングを試みた。ラットHNFー1のDNA結合部位の塩基配列をPCRで単離し、プロ-ブとして用いた。HepG2 cDNAライブラリ-100万個をスクリ-ニングした結果、一つの陽性クロ-ンを得た。現在その塩基配列を決定している。昨年末、残念ながらヒトHNFー1及びHNFー1 variantのcDNAクロ-ニングの報告が発表された。我々が単離したcDNAクロ-ンが、報告されたHNFー1或いはHNFー1 variantと一致するものか、それとも別の新たなHNFー1 variantか検討し、場合によっては発現蛋白の転写促進活性を証明する必要がある。更に、正常肝、肝硬変、肝癌におけるそれらの発現を調べ、肝硬変を含めた初期癌化のマ-カ-となりうるか否か、検討する予定である。3.グリコ-ゲン合成酵素のアイソザイム変化ヒト肝型グリコ-ゲン合成酵素のcDNAクロ-ニングを進めている最中、偶然、ヒト肝癌HepG2細胞のcDNAライブラル-より筋型グリコ-ゲン合成酵素のcDNAクロ-ンを単離した。正常肝cDNAライブラリ-からは肝型のみ単離されることより、癌化に伴うグリコ-ゲン合成酵素のアイソザイムパタ-ンの変化が示唆された。現在、ノザンブロット解析により、肝硬変、肝癌でのアイソザイムパタ-ンの変化を検討中である。

1. The liver cirrhosis specific gene is currently in progress. 2.α-protein development control protein gene expression-α-protein development control domain in the most advanced promotion effect of the high-level domain, write factor HNF-1 binding site report. HNF-1 is a liver-specific mRNA expression factor that is reported to exist in normal liver tissues and recently in cancerous tissues. HepG2 is a hepatocellular carcinoma, and HNF1 is a variant of HepG2. DNA binding sites of HNF-1 are mapped by PCR. HepG2 cDNA translation-1 million results, one positive result Now, the basic arrangement is decided. At the end of last year, a report on the cDNA library of HNF-1 and HNF-1 variants was released. We report the presence of HNF-1 or HNF-1 variant, and we also report the presence of HNF-1 variant. Normal liver, liver cirrhosis, liver cancer, liver cirrhosis, liver 3. The cDNA library of C-DNA synthase in HepG2 cells was isolated from the cDNA library of C-DNA synthase in HepG2 cells. Normal liver cDNA translation- Now, the analysis of liver cirrhosis, liver cancer, liver cancer.