非A非B型肝炎に特異的に発現する遺伝子の同定とその性状について

非甲非乙型肝炎特异表达基因的鉴定及其特性

• 批准号: 61570147
• 负责人: 江角 真理子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570147/
• 关键词: 非A非B型肝炎; 遺伝子クローニング

1.非A非B型肝炎に特異的に発現する遺伝子をみつけるために、以下に示す2つの方法でクローニングを行った。同一チンパンジーで、非A非B型肝炎ウィルス感染前、感染後の肝臓を得ることができなかったので、異なるチンパンジーから2種類の材料を得てmRNAを抽出した。(1)非A非B型肝炎ウィルス感染材料からのcDNAライブラリーの作製mRNAからcDNAを作成し、λファージにくみこみcDNAライブラリーを作成した。正常肝mRNAC感染肝mRNAから【^(32)P】標識のcDNAを各々作製し、現在cDNAライブラリーをスクリーニングしている。(2)非A非B型肝炎特異的なcDNAの分離とクローニング感染肝mRNAよりcDNAを作製し、正常肝mRNAとハイブリッドを形成するcDNAを除き、感染肝mRNAとのみハイブリダイズするcDNAを分離した。これを用いてクローニングを試みている。2.感染肝細胞初代培養によって、非A非B型肝炎ウィルス遺伝子が同定できるか否かを検討した。モデル実験系としてアヒル肝細胞初代培養を行い、アヒルB型肝炎ウィルス遺伝子の合成が検出できるか否かを検討した。【^3H】標識チミジンを用いると細胞内,細胞外共にウィルスDNAが確認できた。この方法を用いて、非A非B型肝炎ウィルス遺伝子を【^3H】標識チミジン或いは【^3H】漂識ウリジンで検出できる可能性がでてきた。現在、検出感度について検討し【^(32)P】漂識化合物の利用も考えている。

1. For patients with non-An and non-B hepatitis, please do not know what to do. The following shows the method of hepatitis An and non-B hepatitis. The same sample, non-hepatitis A, non-hepatitis B, hepatitis A, non-B hepatitis, liver, liver, (1) non-A, non-B hepatitis, infected materials, cDNA, cDNA, and λ, cDNA, cDNA, etc. Normal liver mRNAC infection liver mRNA infection [^ (32) P] tag is known as "cDNA", and now cDNA infection is caused by liver infection. (2) cDNA isolation from patients with non-A, non-B hepatitis, infection with mRNA