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胃壁細胞の分泌細管小胞融合・伸展の分子機構

分泌管-囊泡融合及胃壁细胞延伸的分子机制

基本信息

批准号：
03670359
负责人：
上田俊二
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

モルモット単離胃壁細胞を、位相差顕微鏡下に同定し、バッチクランプ全細胞記録法および位相感受性検出法を適用し、壁細胞膜容量の測定を行った。その結果、壁細胞はヒスタミン刺激に対しては膜容量増加という反応を示し、この反応はピリラミンでは抑制させなかったがシメチジンにより抑制された。この事からこの反応はH_2受容体を介する反応である事が明らかとなった。一方カルバコ-ル刺激では膜容量増加は見られず、膜透過性の亢進が見られるのみであった。次に膜容量増加に至る細胞内伝達機構について検討を加えた。H_2受容体刺激により細胞内CAMPが増加する事より、abcーAMPにより壁細胞を刺激したところ、ヒスタミン刺激と同様の反応が見られた。さらにBAPTAをピプット電極から注入しと細胞内Ca^<2+>イオンを強くキレ-トして、ヒスタミン刺激を行い膜容量変化を測定したところ、膜容量増加は見られなかった。しかし細胞内Ca^<2+>イオンを弱キレ-トした場合にはヒスタミン刺激によって膜容量増加が見られた。この事より膜容量増加には最低限の細胞内Ca^<2+>イオン濃度が必要である事が明らかとなった。次にCキナ-ゼの活性化物質であるOAG、抑制物質であるポリミキシンB存在下でヒスタミン刺激による膜容量増加を検討したが、これらの薬剤は増加反応に対して何らの作用も示さなかった。次にAキナ-ゼの関与を確かめるため、Aキナ-ゼGキナ-ゼに対し抑制作用を持つHー8、Gキナ-ゼに対しより強い抑制作用を持つHー9を作用させて膜容量変化を検討した。その結果ヒスタミンによる膜容量増加はHー8では抑制されたが、Hー9では抑制を受けなかった。従ってヒスタミンによる胃壁細胞膜容量増加Aキナ-ゼを活性化する事により引き起こされる事が明らかとなった。

The gastric parietal cell isolation method, phase contrast microscopy, phase contrast microscopy, whole cell recording method, phase sensitivity detection method, and parietal cell membrane volume measurement are all applicable.そのRESULTS, parietal cell stimulation, membrane volume increase, reaction reaction,この濜はピリラミンでは suppresses させなかったがシメチジンにより suppresses された.この事からこのanti応はH_2 Receiver する Reflection である事が明らかとなった. One side of カルバコ-ル stimulates an increase in membrane capacity and an increase in membrane permeability. When the membrane capacity is increased, it is necessary to reach the mechanism inside the cell. H_2 receptor stimulation, intracellular CAMP, increase of CAMP, abcーAMPによりParietal cell をstimulationしたところ、ヒスタミンstimulationと同様のanti応が见られた.さらにBAPTAをピプットelectrodeからInjectionしとIntracellular Ca^<2+>イオンを强くキレ-トして, ヒスタミンstimulationを rowいmembrane capacity changeをmeasurementしたところ, membrane capacity increaseは见られなかった. The intracellular Ca^<2+>イオンを weak キレ-トした occasion にはヒスタミン stimulates the によって membrane capacity to increase が见られた. It is necessary to increase the membrane capacity by increasing the minimum intracellular Ca^<2+> and the intracellular Ca^<2+> concentration. In the presence of にCキナ-ゼのactivating substance であるOAG and inhibitory substance であるポリミキシンB, でヒスタミンthorn The capacity of the membrane is increased, and the capacity of the membrane is increased. SubaruAキナ-ゼの关 and をOKかめるため、Aキナ-ゼGキナ-ゼに対し inhibiting effectをholdつHー8. The inhibitory effect of Gキナ-ゼに対しより is strong and the inhibitory effect of Gキナ-ゼに対しより is strong and the inhibitory effect of Gキナ-ゼに対しより is strong and the effect of Hー9を is the change of membrane capacity and the change of membrane capacity.そのRESULTS ヒスタミンによる membrane capacity increase は Hー8 では suppressed されたが, Hー9 では suppressed けなかった. The gastric parietal cell membrane capacity increases.