モルモット胃壁細胞上のマキシ及びミニClチャネルの機能的相関関係の解析

豚鼠胃壁细胞大、小Cl通道功能关系分析

• 批准号: 08268227
• 负责人: 上田 俊二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268227/
• 关键词: エンドセリン受容体; 胃壁細胞; パッチクランプ実験法; Cl^-電流; ミニCl^-チャネル; マキシCl^-チャネル

我々は今までにモルモット胃壁細胞基底側膜にETb受容体の存在とそれにカップルするMaxi‐Cl^-チャネル(300ps)と、非刺激時にみられる細胞外溶液pHに感受性をもつMini‐Cl^-チャネル(<1ps)の存在を見出し、それらの電気生理学的、薬理学的性質の違いを明らかにしてきた。本年度の分担研究では、この両者のチャネルに関与する細胞内情報伝達系を明かとすることを目的とした。その結果この両者のチャネルは細胞内Ca^<2+>,cyclicAMP,cyclicGMP,GTPrS,および細胞容積変化には依存性を示さなかった。また酸分泌刺激剤、プロトンポンプインヒビターに対してもなんらの感受性を示さず、アラキドン酸、プロスタグランヂン、H‐7等も作用を示さなかった。しかしながら、Maxi‐ClチャネルはTyrosine Phosphatase 阻害剤であるVO_4で著名な抑制が見られた。一方Serine/Threonine Phosphatase阻害剤であるOkadaic Acidでは抑制されなかった。このことはMaxi‐Cl^-チャネルがTyrosine Phosphataseにより活性化される可能性を示している。また細胞内にGTPrSを存在させた状態でET‐1で刺激を行うと、単にMaxi‐Cl^-チャネルを抑制するのみではなくさらにMini‐Cl^-チャネルの抑制も認められた。しかしGTPrS存在下でのETb受容体agonistであるIRL1620刺激ではMini‐Cl^-チャネルの抑制は見られずMaxi‐Cl^-チャネルの活性化が認められた。GTPrS単独ではこの両者のチャネルに作用を示さないことから、この抑制作用は何らかのG蛋白とETb受容体以外のET受容体とのクロストークにより引き起こされると考えられた。

Today I 々 は ま で に モ ル モ ッ ト parietal cell side of basal membrane に ETb exist by let body の と そ れ に カ ッ プ ル す る Maxi ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル (300 ps) と, the stimulation に み ら れ る extracellular solution pH に susceptibility を も つ Mini ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル (< 1 ps) の exist を see し, そ れ ら の 気 physiology The nature of pharmacology and pharmacology is <s:1> contrary to を を, ら に, <s:1> て, た, た. の share this year study で は, こ の struck is の チ ャ ネ ル に masato and す る intelligence 伝 in cells of を and Ming か と す る こ と を purpose と し た. そ の results こ の struck is の チ ャ ネ ル は intracellular Ca ^ 2 + > <, cyclicAMP, cyclicGMP, GTPrS, お よ び - cell volume change に は dependency を shown さ な か っ た. ま た acid secretion stimulant, プ ロ ト ン ポ ン プ イ ン ヒ ビ タ ー に し seaborne て も な ん ら の susceptibility を shown さ ず, ア ラ キ ド ン acid, プ ロ ス タ グ ラ ン ヂ ン を, 7 H ‐ も role さ な か っ た. し か し な が ら, Maxi ‐ Cl チ ャ ネ ル は Tyrosine Phosphatase resistance against tonic で あ る VO_4 で な inhibit が see famous ら れ た. One Serine/Threonine Phosphatase inhibitor であるOkadaic Acidで である inhibits されな った った. こ の こ と は Maxi ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル が Tyrosine Phosphatase に よ り activeness さ れ を る possibility in し て い る. ま た intracellular に GTPrS を exist さ せ た state で ET ‐ line 1 で stimulate を う と, 単 に Maxi ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル を inhibit す る の み で は な く さ ら に Mini ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル の inhibit も recognize め ら れ た. Presence of し か し GTPrS で の ETb by let body agonist で あ る IRL1620 stimulus で は Mini ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル の inhibit は see ら れ ず Maxi ‐ Cl ^ - チ ャ ネ ル の activeness が recognize め ら れ た. GTPrS 単 alone で は こ の struck is の チ ャ ネ ル を に role さ な い こ と か ら, こ の inhibition は what ら か の G protein と ETb the let body の ET outside the capacity of body と の ク ロ ス ト ー ク に よ り lead き up こ さ れ る と exam え ら れ た.

项目成果

T.Tsumura: "Sensitivity of volume‐sensitive Cl^- conductance in human epithelial cells to extracellular nucleotides." Am.J.Physiol.271. C1872‐C1878 (1996)

T.Tsumura：“人上皮细胞中体积敏感的 Cl^- 电导对细胞外核苷酸的敏感性。”Am.J.Physiol.271（1996）。

M.Tominaga: "ONO‐1078 antagonizes diarrhea‐causiong changes in ion transport and smooth muscle contraction induced by peptidoleukotrines in rat and human colon in vivo" J.Pharm.Exp.Therap.278. 1058‐1063 (1996)

M. Tominaga：“ONO-1078 拮抗大鼠和人结肠体内肽白三烯引起的离子转运和平滑肌收缩引起的腹泻变化”J.Pharm.Exp.Therap.278（1996）。

Y.Imada-Shirakata: "Serotonin activates electrolyte transport via 5-HT_<2A> receptor in rat colonic crypt cells." Biochem.Biophys.Res.Comm.230,. 437-441 (1997)

Y.Imada-Shirakata：“血清素通过大鼠结肠隐窝细胞中的 5-HT_<2A> 受体激活电解质转运。”