NDPキナ-ゼの構造と機能および遺伝子に関する研究

NDP激酶的结构、功能及基因研究

• 批准号: 03671078
• 负责人: 木村 成道
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03671078/
• 关键词: NDPキナ-ゼ; cDNA; アイソフォ-ム; 遺伝子単離; 蛋白一次構造

NDPキナ-ゼは(d)NTP形成と主な役割として生物界に普遍的に存在する必須の酵素である。近年、本酵素が情報伝達,癌転移あるいは形態形成などにおいて調節的役割を担うことが,私共を含めいくつかのグル-プによって明らかになってきた。本研究は,このような多彩な役割をもつと思われる本酵素に関して,(1)アイソフォ-ムの単離を含む蛋白化学的研究,並びに(2)遺伝子の単離と構造決定を目的として行われ,以下に示す成果を挙げることが出来た。研究成果ー(1)アイソフォ-ムの単離:既報のcDNAライブラリ-を緩い条件下でスクリ-ニングし,クロスハイブリダイズするものの中から新規cDNA(β)を単離することに成功した。既知のもの(α)と比較すると,翻訳産物はいずれも152アミノ酸残基から成り,両者は16残基が異っていた。ノ-ザン分析の成果,αは心,腎などで高発現しているのに対し,βは脳で高い発現を示し,両者の発現の様式は異っていた。(2)遺伝子の単離と構造解析:ラットゲノムライブラリ-をNDPキナ-ゼαアイソフォ-ムcDNAを用いてスクリ-ニングしたところ,全長を含むクロ-ンを単離することが出来た。α遺伝子は全長約5.5kbで,4エクソンから成ることが判明した。プライマ-伸長法,RNAaseプロテクション法によって,転写開始部位は翻訳開始コドンATGの3ベ-ス上流にあることがわかった。また、イントロン構造をもたないプロセスされた偽遺伝子が多数存在し,その中の5つについて凡その塩基配列を決定し確認した。

NDP キ ナ - ゼ は (d) the NTP form と main cutting と な service し て biological に exist common に す る must の enzyme で あ る. Carcinoma, in recent years, this enzyme が intelligence 伝 was planning to move あ る い は morphogenetic な ど に お い て adjustment "を cut bear う こ と が, private altogether を containing め い く つ か の グ ル - プ に よ っ て Ming ら か に な っ て き た. This study は こ の よ う な colorful な service cut を も つ と think わ れ る this enzyme に masato し て, (1) ア イ ソ フ ォ - ム の 単 from を contains む protein chemistry research, and び に (2) heritage 伝 son の 単 purpose decision を from と structure と し て line わ れ, に す results indicated below を 挙 げ る こ と が た. Research results ー (1) ア イ ソ フ ォ - ム の 単 from: both the の cDNA ラ イ ブ ラ リ - を under the condition of slow い で ス ク リ - ニ ン グ し, ク ロ ス ハ イ ブ リ ダ イ ズ す る も の の in か ら new rules cDNA (beta) を 単 from す る こ と に success し た. Both know の も の (alpha) と comparative す る と, double 訳 product は い ず れ も 152 ア ミ ノ acid residues か ら り, who struck は 16 residues が different っ て い た. の ノ - ザ ン analysis results, alpha は heart, kidney な ど で high 発 now し て い る の に し seaborne, beta は 脳 で high い 発 now を し, who struck の 発 is の others type は different っ て い た. (2) heritage 伝 son の 単 from と structure: ラ ッ ト ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ - を NDP キ ナ - ゼ alpha ア イ ソ フ ォ - ム cDNA を with い て ス ク リ - ニ ン グ し た と こ ろ, span を containing む ク ロ - ン を 単 from す る こ と が た. The total length of the α -derivative 伝 sub-is approximately 5.5kbで, and 4エ ソ ソ ソ ら ら are used to determine た. プ ラ イ マ - elongation method, RNAase プ ロ テ ク シ ョ ン method に よ っ て, planning to write parts は turn 訳 began コ ド ン ATG の 3 ベ - ス upper に あ る こ と が わ か っ た. ま た, イ ン ト ロ ン tectonic を も た な い プ ロ セ ス さ れ た pseudo heritage 伝 が most existing し, そ の の 5 つ に つ い て every そ の salt base with column を decided し confirm し た.

项目成果

木村 成道: "III内分泌Aホルモン一般1a作用機序ーペプチドホルモン" Annal Review内分泌,代謝1992. 130-134 (1992)

Narimichi Kimura：“III 内分泌 A 激素一般 1a 作用机制 - 肽激素”Annal Review Endocrinology, Metabolism 1992. 130-134 (1992)

木村 成道: "転移抑判遺伝子nm23とNDPキナ-ゼ" 組織培養. 17. 278-282 (1991)

Narimichi Kimura：“转移抑制基因 nm23 和 NDP 激酶”组织培养 17. 278-282 (1991)。

Hirayama,R.,et al.: "Positive relationship between expression of anti-metastatic factor (nm23gene product or nucleside diphosphate kinase) and good prognosis in human breast cancer" J.Natl.Cancer Inst.83. 1249-1250 (1991)

Hirayama, R., et al.：“人类乳腺癌中抗转移因子（nm23 基因产物或核苷二磷酸激酶）的表达与良好预后之间的正相关”J.Natl.Cancer Inst.83。

Ishikawa,N.,et al.: "Isolation and characterization of a gene encoding rat nucleoside diphosphate kinase" J.Biol.Chem.(1992)

Ishikawa,N.,et al.：“编码大鼠核苷二磷酸激酶的基因的分离和表征”J.Biol.Chem.(1992)

木村 成道: "NDPキナ-ゼと癌の転移" 実験医学増刊. 9. 1606-1609 (1991)

木村成通：《NDP 激酶与癌症转移》实验医学特别版。9. 1606-1609 (1991)