ニューモシスティス・カリニ感染に対する防除方法の研究

卡氏肺孢子虫感染防治方法研究

• 批准号: 03680045
• 负责人: 伊藤 守
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Central Institute for Experimental Animals
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03680045/
• 关键词: pneumocystis carinii; 消毒薬; 栄養体; ニュ-モシスティス・カリニ; 消毒; 化学療法; 診断; PCR; SCIDマウス

本研究課題は日和見感染病原体であるP.carinii(Pc)感染成立の要因を明瞭にし、その伝播防止と駆除に適切な方法を構築することにある。前年度までに、SCIDマウスを用いた感染実験系および確定診断法として確立したPCR法を用いて、P.cariniiの温度などの環境因子に対する抵抗性などを明らかにしてきた。本年度は、以下に示す乾燥に対する抵抗性、消毒薬の効果に加え、マウス感染肺からの栄養体分取を検討した。1.Pcの環境因子および消毒薬への抵抗性の検討: Pcシストに対して一般的に用いられている8種類の消毒薬ーアルサイド、次亜塩素酸ナトリウム、マイクロカット、ハイアミン、消毒用オキシドール、消毒用エタノールおよびヨードホールーの効果を知る目的で、マウス感染肺乳剤をこれら消毒薬で処置後、SCIDマウスに鼻腔内接種した。これらマウスでの感染を指標にした判定では、次亜塩素酸ナトリウム以外は極めて消毒効果が高いことが分かった。次亜塩素酸ナトリウムで効果が弱いことが今後の課題である。また、一か月間の乾燥、30分間の紫外線照射でも感染は成立しなかった。前年度の結果と合わせると、一般的に考えられているほどPcシストは強いものではないことが分かった。2.Pc栄養体の分取法の検討: マウス肺乳剤から高率にPc栄養体を採取する方法として、陰圧下での肺洗浄法後の2段階遠心法で満足のいく結果が得られた。すなわち、洗浄液の10,000rpm、3分間の遠心でシスト、前シストおよび凝集栄養体が沈渣として得られ、上清の13,000rpm、10分間の遠心で遊離栄養体が得られることが、DAPI、抗Pc抗体との2重蛍光染色法で明らかにされた。現在、栄養体による感染過程は明瞭ではなく、今回分取できた遊離栄養体を用いた感染実験が可能と考えられる。

This study aims to clarify the causes of infection with P. carinii(Pc) and to establish appropriate methods for its prevention and elimination. In the past year, SCID was used to determine the infection system and establish the resistance of PCR to temperature and environmental factors. This year, the following is a review of the effects of drying, disinfection, and isolation of infected lung tissue 1. Study on the resistance of Pc to environmental factors and disinfectants: Pc is suitable for general use, including 8 kinds of disinfectants, such as disinfectant, hypochlorid, disinfectant, disinfectant, and so on. The infection index is determined according to the results of disinfection. The next step is to improve the quality of the product.また、一か月间の干燥、30分间の紫外线照射でも感染は成立しなかった。The results of the previous year were as follows: 2. The method of separation of Pc-containing substance: the method of separation of Pc-containing substance from milk at high rate and the method of separation of Pc-containing substance from lung at low pressure were studied. 10,000 rpm, 3 min telecentric washing solution, 3 min precentric washing solution, 10 min telecentric washing solution, 13,000 rpm supernatant, 10 min telecentric washing solution, 10 min DAPI, anti-Pc antibody, 2-fold fluorescent staining. Now, the process of infection in the culture medium is clear, and now it is possible to isolate the free culture medium and infection.

项目成果

Ito,M.et al.: "Study on Placental Transmission of Pneumocystis carinii in Mice using Immunodeficient SCID Mice as a New Aminal Model" Journal protozoology. 38. 218-219 (1991)

Ito,M.et al.：“使用免疫缺陷 SCID 小鼠作为新的动物模型研究卡氏肺囊虫在小鼠中的胎盘传播”杂志原生动物学。

Furuta,T.et al.: "Effect of Sulfamethoxazole-Trimethoprime and Sulfadoxine-Primethoprime Against Fetal Pneumocystosis in Mice." Jourwal Protozoology. 38. 221-222 (1991)

Furuta,T.et al.：“磺胺甲恶唑-甲氧嘧啶和磺胺多辛-甲氧嘧啶对小鼠胎儿肺囊虫病的作用。”

Furuta,T.et al.: "Severe Combined Immunodeficient (SCID)Mice as an New Mouse Model to Study Efficacy of drugs for Treatment of Pneumocystosis" Laboratory Animal Science.

Furuta,T.et al.：“严重联合免疫缺陷 (SCID) 小鼠作为新的小鼠模型来研究肺囊虫病治疗药物的功效”实验动物科学。