GH_3細胞でのセカンドメッセンジャ-によるCaチャンネルの修飾

GH_3 细胞中第二信使对 Ca2+ 通道的修饰

• 批准号: 03680223
• 负责人: 鈴木 信之
• 金额: --
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03680223/
• 关键词: カルシウムチャンネル; 細胞内情報伝達; セカンドメッジンジャ-; ホルモン分泌; 電気生理学; イノシト-ルリン肪質代謝

GH_3細胞は、サイロトロビン放出ホルモン(TRH)刺激により細胞内Caイオン濃度の上昇をおこし、プロラクチンを分泌する。 TRH刺激により、細胞内情報伝達経路を介して、二種類のCaチャンネルがどのような調節を受けるかを調べた。 wholeーcell voltageーclamp法により、低閾値で活性化され持続時間の短いT型Ca電流、高閾値で持続の長いL型Ca電流を記録した。TRH刺激によりT型電流の増加とL型電流の可逆的な減少が起こることが、はじめて明かになった。同様の効果は、外液にTRHが存在しなくても、非水解性GTPアナログ(GTPYS)の細胞内への投与によっても起こった。 この時、TRH、GTPySの投与により、T型、L型電流の両者とも、それらの活性化、不活性化の膜電位依存性は有意に変化しないことが分かった。さらに、百日咳毒素を前処理すると,このようなTRH、GTPySのT型チャンネルへの効果は消失する。L型チャンネルの効果が百日咳毒素により阻害されるかどうかについてはまだ確認していない。 これらの事を総合すると、TRHは、T型、L型チャンネル電流の性質を変えることなく、それらの振幅のみを増、減させることにより、Caイオンの細胞内への流入を調節していることが明らかになった。 GH_3細胞の場合、TRH刺激によるイノシト-ルリン脂質代謝(PI)回転が生化学的に実証されている系である。 このPI回転に関与するGタンパク質は百日咳毒非感受性であることが分かっているので、我々により得られたTRHによるT型電流の増加のメカニズムには、PIのセカンドメ-センジャ-は関与しないことが示唆された。 Cキナ-ゼの活性化剤である膜透過性。フォルボ-ルジブチレ-ト(PDBu)を細胞外に投与しても、T型Ca電流の増加は起こらなかったので、T型Ca電流の増加には少なくともCキナ-ゼは関与していないことが分かった。

GH_3 cells are stimulated by TRH to release Ca ~(2 +) and secrete Ca ~(2 +). TRH stimulation, intracellular information transmission pathway, two kinds of Ca ~(2 +)-induced regulation The whole cell voltage clamp method is used to record the short T-type Ca current with low threshold and the long L-type Ca current with high threshold. TRH stimulation increases T-type current and decreases L-type current reversibly In the same way, TRH exists in vitro, and GTPYS are produced in vitro. The time, TRH, GTPyS and the membrane potential dependence of the activation and inactivation of the current are intentionally changed. The effects of T-type infection of pertussis toxin are eliminated. L-type toxin production results in pertussis toxin resistance and identification. The nature of the current in the T-shaped, L-shaped and T-shaped cells changes, the amplitude of the current increases, the amplitude of the current decreases, and the intracellular flow of Ca is regulated. In the case of GH_3 cells, TRH stimulation of lipid metabolism (PI) is a biochemical phenomenon. The PI circuit is not sensitive to pertussis virus. The PI circuit is not sensitive to pertussis virus. The PI circuit is not sensitive to pertussis virus. The PI circuit is not sensitive to pertussis virus. C- The increase of T-type Ca current in the extracellular phase of the cell is related to the increase of T-type Ca current in the extracellular phase.