ヘム蛋白質,ヘム酵素の生理活性部位のNMRによる新規な構造決定法の構築

利用NMR构建血红素蛋白和血红素酶生理活性位点的新型结构测定方法

• 批准号: 05750797
• 负责人: 山本 泰彦
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05750797/
• 关键词: NMR; ヘム蛋白質; 常磁性分子; 構造解析; ミオグロビン

ウマ心筋ミオグロビン、サメ(エイラクブカ)赤筋ミオグロビンの生理活性中心部位であるヘム近傍のNMRによる構造決定を行なった。NMRによる構造研究の第一段階は、観測されるシグナルの帰属であるが、本研究により、飽和移動法が常磁性ヘム蛋白質のさまざまな配位状態でのシグナル帰属に利用可能であることが初めて示された。また、本法によりシグナル帰属だけではなく、ヘム蛋白質の配位子結合反応の速度も定量的に決定できることが示された。二次元NMR法によるシグナル帰属、常磁性シフトしたシグナルのシフト値の温度依存性、核オーバーハウザ-効果の観測と解析による、ヘム側鎮の内部運動性の評価、を総合的に解釈する構造解析法をサメのミオグロビンに適用した結果、このミオグロビンのヘムは、まわりの蛋白質に対して、固定されてはいないで、温度の変化と共にヘムの蛋白質に対する配向が変わることが示された。このような、ヘムの動きが、天然のミオグロビンで検出されたのは、今回が、初めてである。ミオグロビンの機能調節に重要な役割りをはたしている遠位残基に着目し、フェリ型ミオグロビンでの酸-塩基平衡に及ぼす影響をNMRにより解析した結果、一般的、ミオグロビンが持つヒスチジン残基の側鎖のイミダゾール環は、ヘム鉄に結合した配位子に対する水素結合に、プロトンのドナーとしても アクセプターとしても働ける能力があり、配位子の結合状態を安定化するという点に関しては、その有用性が確認できる実験結果を得た。

I don't know how to make a decision on the physiological activity center. I don't know how to make a decision. I don't know what to do. I don't know what to do. In the first part of the NMR study, the first part of the study. In this method, the protein ligand is used in combination with the quantitative determination of the speed. In the two-dimensional NMR method, the temperature dependence, the temperature dependence, the nuclear temperature dependence, the temperature dependence, the temperature dependence, the Fix the temperature, change the temperature, and change the temperature to show that the protein is aligned. This is the first time you have heard the news, the first time you have heard it, the first time you have heard it. The equipment can be used to analyze the results of the analysis of the acid-base balance and the impact of the NMR. The results of the analysis, the results of the analysis, the This means that you need to know how to improve your ability, and your usefulness.

项目成果

山本 泰彦: "Use of thiocyanate ion as a mediator ligand in connecting Acidic and alkaline forms of feiric myoglobin via paramagnetic 'H-NMR saturation transfer" Biochemical Biophysical Research Communications. 196. 348-354 (1993)

Yasuhiko Yamamoto：“通过顺磁 1H-NMR 饱和转移，使用硫氰酸根离子作为介体配体连接酸性和碱性形式的铁肌红蛋白”，《生物化学生物物理研究通讯》196. 348-354 (1993)。