フグ毒耐性生物のナトリウムチャンネルの構造と機能に関する研究

河豚抗毒生物钠通道结构与功能研究

• 批准号: 05760089
• 负责人: 山下 まり
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760089/
• 关键词: フグ毒; ナトリウムチャンネル

フグ毒テトロドトキシン(TTX)は電位依存性Na_+チャンネルに特異的に結合し不活性化するが、フグが体内のTTXに耐性を示す機構は解明されていない。我々は、Na_+チャンネル上でTTXと同一部位に結合するサキシトキシンの解離定数を調べ、フグでは他の生物より大きいことを見い出した。この特性は、構造に由来すると考えられたので、フグ筋肉Na_+チャンネルをクローニングし、一次構造を明らかにすることを目的として本研究を行った。まず、ランダムプライマーを用いてヒガンフグ筋肉の全RNAからcDNAを合成し、既報の電位依存性Na_+チャンネルの塩基配列を参考にして設計したプライマーを用いてPCR法を行った。これにより得られた断片をクローン化し、複数個のクローンについて塩基配列を解析した結果、これらがフグ由来のNa_+チャンネルの一部であること、また、2種以上のサブタイプが存在することが推定された。次に、これらをプローブとしてランダムプライマーを用いたフグ筋肉由来のcDNAライブラリーをスクリーニングし、陽性クローン得た。このクローンの塩基配列を基にプライマー延長法を用いて上流域を得た。また、同クローンの一部をプローブとして、オリゴdTを用いたcDNAライブラリーから下流域を得た。現在、TTXの感受性を決定すると報告されている領域のアミノ酸配列を含め、解析を進めている。

TTX is a potential-dependent, Na +-specific binding mechanism that inhibits TTX tolerance in vivo. I'm not sure if it's true. This study was carried out in order to investigate the origin and development of the structure. DNA synthesis of cDNA and cDNA alignment of cDNA in cDNA The analysis results of the base arrangement of a plurality of fragments, and the estimation of the existence of more than two kinds of fragments. Next, we will use the cDNA to extract the protein from the genome. The basic arrangement of the two groups is based on the method of using the upper basin. In addition, part of the same cookie is available in the downstream domain for cDNA editing and editing. Now, TTX susceptibility determination, report, field, acid allocation, analysis, progress.