未解明生体内蛋白質糖化反応および架橋反応生成物の探索と活性評価
未鉴定的体内蛋白质糖化反应和交联反应产物的搜索和活性评价
基本信息
- 批准号:17035011
- 负责人:
- 金额:$ 2.05万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.糖とチオール付加反応生成物の同定と生理活性評価:^<13>Cラベル化グルコース、フルクトースとシステイン、グルタチオンなどの生体内チオールと生体内条件下でインキュベートして生成物を同定した。グルコースとグルタチオンでは、中性状態でインキュベートすると、グルコース1位とシステイン残基のチオールとアミノ基がチアゾリジンを形成し、その後グルタミン酸が加水分解されて安定化することが判明した。この化合物を各種細胞に供したが、特に活性は認められなかった。一方、フルクトースとグルタチオンはチアゾリジンを形成しにくく、ケトースとは体内でも反応しにくいことが推側された。グルコースの場合、このようなアダクトを容易に形成した。これまで、システインとグルコースのアダクトは血液中から同定されているが、グルタチオンのアダクトは追求されてない。このin vitroの反応性から考えて、血中でもシステニルグリシンのグルコースアダクトは存在するものと考えられた。2.酸化蛋白質の架橋反応生成物の解析と活性評価:卵殻膜リジルオキシダーゼは蛋白質架橋反応に関与しているのでその反応特性から調べた。その結果、本酵素はアミノ酸のD, L体の区別なく反応し、アミノ酸のαアミノ基には反応しないで、Lys, Ornなどの1級アミノ酸のみに反応することがわかった。この酵素を用いて、蛋白質酸化モデルのα-N-acyl adipic semialdehyde(AAS)およびα-N-acyl gultamic semialdehyde(GGS)を調整し、各種細胞に供したが特に活性は認められなかった。一方、無保護のD-オルニチン(Orn)に本酵素を反応させると、複雑な混合物を与えたが、NMR解析の結果、プロリンなどの代謝物である、D-pyrroline-5-carboxylate(P5C)を主成分として与えることがわかった。また、この化合物は非常に弱いながら(IC_<50>0.1mM程度)caspase-3を阻害することがわかった。L-Ornからも同じ反応条件でNMRで全くD体と同じ生成物が示されたが、L体はこの活性を示さなかった。このことからCaspase-3阻害活性はD-アミノ酸代謝物の未知の生理活性であることが示唆された。3.蛋白質の酸化程度を定量する方法の確立と応用蛋白質酸化で生じるAAS, GGSをp-aminobenzoic acidで蛍光ラベル化し、イミンを還元後に蛍光HPLCで定量する方法を完成した。
1. Evaluation of the identity and physiological activity of sugar and sugar products: In vivo, the identity of products under in <13>vivo conditions. In the neutral state, the residue at position 1 of the protein was formed, and then the protein was hydrolyzed and stabilized. These compounds are available to all kinds of cells and are especially active. A party, a party In the case of a problem, it is easy to form a problem. This is the first time that a person has been arrested. This is the first time in history that a woman has ever lived. 2. Analysis and activity evaluation of bridging products of acidified protein: protein bridging reaction is related to protein bridging reaction and its characteristics are regulated. As a result, the enzyme is able to differentiate between D, L and α-amino acids, Lys, Orn and 1-amino acids. The enzyme activity is regulated by the enzyme activity, protein acidification, and α-N-acyl adipic semialdehyde (AAS). One side, unprotected D-pyrrol-5-carboxylate(P5C), the principal component of this enzyme, was analyzed by NMR. These compounds are very weak in inhibiting <50>caspase-3 (IC_0.1 mM). L-Orn is the same as the reaction condition, NMR is the same as the reaction condition, NMR is the same as the reaction condition. Caspase-3 Inhibitory Activity: Unknown Physiological Activity of D-Arginine Metabolite 3. Establishment of a method for quantification of protein acidification by AAS, GGS, p-aminobenzoic acid and HPLC
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hydrophillc interaction liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry of tetrodotoxin and its analogs
河豚毒素及其类似物的亲水作用液相色谱-电喷雾电离质谱法
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shigeru Arai;Fumie takahashi;Riichiro Tsuji;Atsushi Nishida;Raphael Ritson-Williams;Toshio Nakagawa
- 通讯作者:Toshio Nakagawa
Identification of the cyclic animal forms of α-aminoadipic and γ-glutamic semialdehydes as the major forms in aqueous solution
水溶液中主要形式的 α-氨基己二酸和 γ-谷氨酸半醛的环状动物形式的鉴定
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shigeru Arai;Fumie takahashi;Riichiro Tsuji;Atsushi Nishida;Raphael Ritson-Williams;Toshio Nakagawa;Mari Yotsu-Yamashita
- 通讯作者:Mari Yotsu-Yamashita
Ecological functions of tetrodotoxin in a deadly polyclad flatworm
- DOI:10.1073/pnas.0506093103
- 发表时间:2006-02-28
- 期刊:
- 影响因子:11.1
- 作者:Ritson-Williams, R;Yotsu-Yamashita, M;Paul, VJ
- 通讯作者:Paul, VJ
Topics in Heterocyclic Chemistry (Spectroscopic study of the structure of zetekitoxin AB)
杂环化学专题(zetektoxin AB 结构的光谱研究)
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shigeru Arai;Fumie takahashi;Riichiro Tsuji;Atsushi Nishida;Raphael Ritson-Williams;Toshio Nakagawa;Mari Yotsu-Yamashita;Mari Yotsu-Yamashita
- 通讯作者:Mari Yotsu-Yamashita
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