プラスミド供与菌における接合伝達活性化ペプチド“性フェロモン"の受容機構

质粒供体细菌中接合转移激活肽“性信息素”的接收机制

• 批准号: 05760096
• 负责人: 中山 二郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760096/
• 关键词: Enterococcus faecalis; プラスミド; 性フェロモン; ペプチド結合タンパク質; フェロモン受容; 部位特異的変異導入

溶血性連鎖球菌の一種Enterococus faecalisには、プラスミド受容菌が分泌するペプチド″性フェロモン″により、供与菌と受容菌の凝集が誘導され、その伝達を活性化されるプラスミドが他種類存在する。これらのプラスミドはそれぞれ構造の異なるフェロモンに特異的に応答する。本研究は、このフェロモンの特異的認識機構を分子レベルで解明することを目的としたものである。本研究ではまず、性フェロモンに応答するプラスミドの一種であるpPD1により、性フェロモンの受容に関係すると考えられる遺伝子のクローニングを行なった。予想される遺伝子産物の分子量は61kDaと計算された。そのアミノ酸シーケンスは、同じく性フェロモンに応答するプラスミドpAD1、pCF10より既にクローニングされ、フェロモンの受容に関係していることが示唆されているTraC、PrgY産物のシーケンスに高い相同性を示した。そこで、この遺伝子をpPD1のtraCと同定した。これらの遺伝子産物はまた、Bacillus subtilisなどから発見されている、オリゴペプチド結合タンパク質とも相同性を示し、このことから、TraC産物はフェロモンを結合することにより、フェロモンのシグナルの受容に貢献していると考えられた。次ぎに、このtraCの遺伝子破壊を、相同組換えを用いた部位特異的変異導入により行なって、プラスミドpAM351CMを得た。pAM351CMを保持する菌は、野性型のpPD1に比べ5倍量の性フェロモンが、その凝集の誘導に必要であった。このことは、TraC産物は、性フェロモンの感受性に、貢献しているが、必須ではないことを示唆している。今後タンパク質レベルで、TraCと性フェロモンの相互作用を研究することにより、フェロモンとプラスミド間の特異性の解明に繋がると期待する。

Enterococus, a type of hemolytic linkage coccus faecalis には, プラスミド tolerated bacteria が secretion するペプチド″性フェロモン″ により, There are other types of agglutination induction and activation of donor and recipient bacteria.これらのプラスミドはそれぞれstructuralのdifferentなるフェロモンにSpecial に応answerする. The purpose of this study is to understand the specific cognitive mechanism of the molecular structure and the purpose of this study. The purpose of this study is to find out more about the nature of the research . It is assumed that the molecular weight of the product is 61 kDa and calculated.そのアミノ acid シーケンスは、 Same sex フェロモンに応respond するプラスミドpAD1、pCF10よりにクローニングされ, フェロモンの tolerated relationship していることがshows the されているTraC, PrgY product のシーケンスに高いidentity をshows た.そこで、この伝子をpPD1のtraCと同定した. Bacillus, the product of これらの缝子subtilisなどから発见されている、オリゴペプチドcombinationタンパク性とも Samenessをshowし、このことから、 TraC product is a combination of することにより and フェロモンのシグナルのacceptance contribution していると考えられた. The same combination of ぎに, このtraCの伝子波壊を, and the same combination of えを and いた part-specific changes are introduced into により行なって, and プラスミドpAM351CMを得た. pAM351CM is necessary for maintenance of bacteria and 5 times the amount of wild-type pPD1, and is necessary for induction of agglutination.このことは, TraC product は, sex フェロモンのsensitivity に, contribution しているが, necessary ではないことを Show 唆している. In the future, we will conduct research on the interaction between タンパク性レベルで and TraC と性フェロモンのとにより, フェロモンとプラスミドbetween the specificity of the explanation and the explanation of the system and the expectation of する.