中胚葉形成における分化・増殖因子の機能解析

中胚层形成中分化和生长因子的功能分析

基本信息

批准号：
05760106
负责人：
三木清史
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760106/
关键词：
Brachyury gene expression chimera mouse mesoderm enhancer induction

项目摘要

食環境の健康への影響を解析的に研究し、健康増進に向けての機能性食品設計の指針を得る戦略として、人体構成細胞のモデルとなる培養分化細胞株における組織特異的遺伝子の発現制御機構を探る研究が試されている。発生の初期に出現する中胚葉細胞は、骨、造血、筋肉、脂肪などの組織の細胞へ広く分化する。この過程こそ栄養・食品科学の中心的な研究対象であるにも拘らず、この中胚葉細胞の出現を制御する因子やそれらの作用機構はわかっていない。本研究では、中胚葉細胞への分化をキメラマウスの系で解析することによって、解析的な栄養・食品科学の新しい分野を開拓しようとした。マウスの中胚葉は、受精6.5日目頃に外胚葉から剥離した細胞が原条へ移動する過程で形成される。Brachyury(T)遺伝子は、中胚葉で特異的に発現して中胚葉の形成と細胞分化を制御しているので、中胚葉細胞のマーカー遺伝子として捉えることができる。本研究では、我々が胎児性癌細胞を用いた培養細胞系で見いだしたT遺伝子の制御エレメントが、胚中で機能するかどうかを検定した。そのためにまず、T遺伝子5'上流-2400〜+191の領域の制御下でLacZ遺伝子を発現する2つのES細胞株を単離した。これらの細胞を用いてキメラマウスを作製し、原条が形成される時期の胚を解析したところ、本来T遺伝子が発現している原条ではなく、胚体外領域でbeta-ガラクトシダーゼの発現が見みられた。この結果から、胚の中でT遺伝子の正常な発現を誘導するには、in vitroの系で示した以外の領域が必要であることがわかった。

正在测试研究以研究培养的分化细胞系中组织特异性基因表达控制的机制，这些细胞系是人体细胞的模型，作为一种分析研究食物环境对健康的影响的策略，并获得了对健康促进的功能性食品设计指南。发育早期出现的中胚层细胞在骨骼，造血剂，肌肉和脂肪等组织中的细胞广泛不同。尽管此过程是营养和食品科学研究的核心主题，但控制这些中胚层细胞出现及其作用机理的因素尚不清楚。在这项研究中，我们试图通过分析嵌合小鼠中中胚层细胞的分化来开发分析营养和食品科学的新领域。小鼠的中胚层是在从施肥6.5天左右迁移到根系的外胚层的解离细胞过程中形成的。 Brachyury（T）基因在中胚层中特异性表达并调节中胚层的形成和细胞分化，可以看作是中胚层细胞的标记基因。在这项研究中，我们测试了使用胎儿癌细胞在胚胎中起作用的T基因调节元件是否在培养的细胞系中发现。为此，首先分离出在t基因5'上游区域5'的控制下表达LACZ基因的两个ES细胞系。使用这些细胞制备嵌合小鼠，并在形成根条纹时分析胚胎，并在胚外区域表达β-半乳糖苷酶，而不是在最初表达T基因的根条纹中。这些结果表明，诱导胚胎中T基因的正常表达需要除体外系统中显示的区域以外的其他区域。