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大腸菌耐熱性下痢原因毒素Iのプロ領域の機能と構成アミノ酸

大肠杆菌耐热腹泻毒素I前区的功能及组成氨基酸

基本信息

批准号：
05770201
负责人：
山中浩泰
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tokushima Bunri University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸菌耐熱性下痢原因毒素I(STI)は、菌体外に積極的に分泌されるペプチドである。本毒素は72個のアミノ酸からなる前駆体として生合成され、その構造はプレ領域,プロ領域および成熱STI領域の3領域から構成されている。これまでの研究により、プロ領域の存在が本毒素の効率の良い内膜通過を惹起すること,プロ領域中の保存アミノ酸部位,特に29位から31位に存在する荷電性アミノ酸部位が本機能の発現に寄与すること,STIの活性構造構築に必要な分子内ジスルフィド結合は、大腸菌ペリプラスム中に局在するDsbA酵素によって触媒されることを明らかにした。本年度は、STI分子内ジスルフィド結合形成についてさらに詳細に検討し、以下の成績を得た。1.プロ領域の39位に存在するシステイン残基を部位特異的に種々のアミノ酸に置換した。得られたミュータントでは、いずれもDsbA酵素が機能しなかった。このことは、DsbAの作用に39位のシステイン残基が必要であることを示している。またこれらのミュータントでは、培地中に分泌される毒素分子のプロセッシングの位置が変化した。従って、39位のシステイン残基は毒素前駆体の正常なプロセッシングに対しても重要な残基であることがわかった。2.STI遺伝子を発現したDsbA欠損株の培養上清中に、精製DsbAを加えるとST活性の上昇が認められた。さらにこの培養上清中から単離した毒素分子は、正規のプロセッシング部位で切断を受けた成熟領域のみで構成されていた。以上の結果より、STIの外膜通過は適切なプロセッシングが生じることにより引き起こされ、分子内のジスルフィド結合形成とは非依存的な過程であることが明らかとなった。

The pathogenic toxin I (STI) of resistant dysentery caused by Streptomyces Magnoliae, and the active secretion of bacteria in vitro. The 72 compounds of this toxin were synthesized in the field of synthesis and production, and the fields were classified into the STI domain and the third domain. In the field of medical research and management, there is a high rate of local toxins in the endometrium, which can be sent to the host through the use of drugs to cause cancer, and to preserve the acid sites in the field. In particular, 29 and 31 have the potential to send them to customers locally. It is necessary for the STI activity to be combined with intramolecular microarray, and the central office of the bacteria is sensitive to the activity of DsbA enzymes, the catalyst, and the molecular weight. This year, the combination of STI and intramolecular microspheres has been combined to form a combination of molecular weight and molecular weight, and the following results have been obtained. 1. In the field of medicine, there are several kinds of chemical acids that are specific to the residues in the field. It is necessary to use the DsbA enzyme machine to detect the activity of the enzyme. The function of DsbA is 39 bits. The residue is necessary. Please show it. In the culture, the toxin molecules are secreted and the position is changed. There are 39 residues in the body, and the body is normal and important. It was found that there was a lack of DsbA in the supernatant of 2.STI, DsbA and ST activity in the supernatant. In the supernatant, the toxin molecules were isolated from the supernatant, and the parts of the normal cells were cut off and affected by mature fields. As a result of the above results, the STI adventitia is induced by microsurgery, and the intramolecular DNA is combined to form a process-independent process-independent process.