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大腸菌耐熱性エンテロトキシンIの外膜通過過程の解析

大肠杆菌热稳定肠毒素I外膜通过过程分析

基本信息

批准号：
12770146
负责人：
山中浩泰
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tokushima Bunri University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770146/
关键词：
大腸菌耐熱性エンテロトキシン外膜通過 TolC プロセシング

项目摘要

大腸菌耐熱性下痢原因毒素I(STI)ば、菌体外に積極的に分泌されるペプタイドである。これまでの研究により、STIは前駆体として生合成され内膜を通過した後、ペリプラスム酵素であるDsbAの作用を受けて活性体となること,活性体となったSTIは大腸菌外膜タンパクTolCの機能を介して外膜を通過すること,TolCを介したSTIの外膜通過にはTolCのC末側50〜60番目のアミノ酸領域が重要であることを明らかにした。しかし、STIの外膜通過に重要とされたTolCのC末領域のいかなる性質がその機能の発現に必要であるのかは不明である。そこで本年度は、TolCのC末側50〜60番目のアミノ酸領域に注目し、STIの外膜通過に必要とされる構成アミノ酸を限定するとともに、その性状について検討した。その結果、以下の知見を得た。1.TolCのC末側領域を欠損させた変異TolC産生株を用いて解析した結果、TolCのC末側の構成アミノ酸を58個欠損させてもSTIの外膜通過は低下しなかったが、59個欠損させるとその低下が認められ、60個欠損によりその機能が完全に消失した。しかし、これらの構成アミノ酸の欠損は、TolCの機能単位である三量体の形成には全く影響しなかった。このことは、TolCのC末側59番目と60番目の構成アミノ酸がSTIの外膜通過機能を発揮する上で重要であることを示唆している。2.部位特異的変異法を用いて解析した結果、STIの外膜通過にはTolCのC末端から60番目の構成アミノ酸(Leu)が最も重要な残基であり、この部位のアミノ酸側鎖が疎水性であることがその機能発現に必要であることが明らかとなった。

The pathogenic toxin I (STI) of resistant dysentery caused by Streptomyces Magnoliae, and the active secretion of bacteria in vitro. In this study, we studied the growth and synthesis of the intima of the progenitor of STI, and the effect of the enzyme DsbA on the intima was affected by the active body, the active body, the STI, the outer membrane, the outer membrane and the outer membrane. TolC introduces the outer membrane of STI. It is very important in the field of acid through the end of TolC. The adventitia of STI can detect the necessary information through the important information system of TolC. At the end of the year, TolC has paid attention to the field of acid in the last 50 years, and the adventitia of STI has changed into acid through the necessary information. The results show that the following insights have been received. In the field of 1.TolC