大腸菌耐熱性下痢原因毒素のジスルフィド結合形成の分子論的研究

大肠杆菌耐热腹泻毒素二硫键形成的分子研究

基本信息

  • 批准号:
    06670311
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

毒素原性大腸菌が産生する耐熱性下痢原因毒素にはSTIとSTIIの二種類が存在する。ともに分子内にジスルフィド結合を有しており、この結合の形成は両STの活性構造の構築には不可欠である。しかしその結合過程は不明であった。今年度はこの過程の解明に取り組み、以下の事を明らかにした。1.STIの3本の分子内ジスルフィド結合は大腸菌のペリプラズム酵素であるDsbAで架橋されること。2、STIの前駆体のプレ領域中のシステイン残基は、LsbAが成熟領域に作用してジスルフィド結合を形成する際に必須であること。3、プレ領域中のシステイン残基を置換すると、不活性な前駆体STIがペリプラスムに貯溜する。これはプレ領域中のシステイン残基がジスルフィド結合が形成される以前の成熟ST領域の構造を規定するのに重要であることを示している。4、STIIは精製した抗体を用いればELISAで検出できること。5.4のELISAをもちいて変異株から培地中に分泌されるSTII量を調べた。その結果dsbA遺伝子を欠損した変異株ではSTIIが産生されないこと。6.5の結果はSTIIのジスルフィド結合がDsbAタンパクにより架橋されていること、およびジスルフィド結合が架橋されていないSTIIはプロテアーゼで分解されることを示している。7、6の事実をさらに明らかにするため、システイン残基を置換した変異STII産生株を作成し、パルスラベル実験で解析した。その結果、STIIIの21-36位間のジスルフィド結合の形成がSTIIの安定構造の構築に最も大切であることを明らかにした。
The pathogen of dysentery is resistant to dysentery. The second class of toxigenic toxin STII exists. The ST activity is formed by the combination of the intramolecular concentration and the combination of the molecular weight and the molecular weight. This is a combination of unknown procedures. This year's review process will explain the selection of the organization, and the following events will clearly explain the process. The 1.STI 3 intramolecular DNA fragment was combined with the enzyme enzyme of E. coli, E. coli, E. coli and DsbA. 2. In the field of STI, the mature domain of LsbA plays an important role in the combination of chemical compounds and residues in the field of LsbA. 3. In the field of medicine, the residues are located and the inactive precursors are STI and inactive. In the field of environmental pollution, the residual energy of the whole system is combined to form a mature ST domain. The rules stipulate that it is important to show that it is important. 4. STII fine antibody is used to ELISA out the antibody. 5.4.The secretion of STII was measured in the culture of ELISA plants. Results the results showed that the dsbA spores were less than the normal STII strains. 6.5 the results show that the combination of STII and STII data shows that there is a significant difference between the two groups in the analysis of the data. 7. 6. Please tell me that the residue was placed in the plant, the STII plant was made, and the residue was analyzed. The results of the test, the combination of STIII 21-36 positions and the combination of STII diazepam and diazepam test results show that the most important step is to improve the accuracy of the test.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Shunji Hitotsubashi: "Binding protein for Escherichia coli heat-stable enterotoxin II in mouse intestinal membrane" FEMS Microbiology Letters. 122. 297-302 (1994)
Shunji Hitotsubashi:“小鼠肠膜中大肠杆菌热稳定肠毒素 II 的结合蛋白”FEMS 微生物学快报。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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Hiroyasu Yamanaka:“大肠杆菌热稳定肠毒素 I 的成熟途径:二硫键形成所需的 DsbA”Bacteriolofy 锦标赛。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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一桥俊二:“用 ELISA 和 PCR 检测产生耐热性腹泻毒素 II 的大肠杆菌”卫生化学 41. 67-76 (1995)。
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  • 发表时间:
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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知道了