緑膿菌サイトトキシンの構造と機能に関する研究

铜绿假单胞菌细胞毒素的结构与功能研究

• 批准号: 05770184
• 负责人: 大西 真
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770184/
• 关键词: 緑膿菌; サイトトキシン; 溶血活性; オリゴマー形成; 前駆体毒素

CTXの活性機序;CTXが標的細胞膜上で145-150kDaのオリゴマーを形成することが確認された。赤血球を利用し解析を行うと、赤血球の動物種・インキュベーション時間・温度・pHを変化させた場合の溶血活性の変化に相関して、オリゴマー形成が増減することが認められた。また、ヒトリンパ球・ウサギ多形核球膜上でも、同様のオリリゴマ-が形成されることが確認された。これらのことより、CTXの細胞崩壊活性に、オリゴマー形成が密接に関与すると考えられた。加えて、内部マーカーとしてカルボキシフルオレセイン(CF)を封入したリポソームからのCFの流出がCTX濃度依存的におこることとともに、リポソーム上にもオリゴマーが形成されることが見い出され、オリゴマー形成が標的細胞膜のタンパク質の有無に関わらずおこることが示された。CTXをジエチルピロカルポネート処理することにより細胞崩壊活性が消失した。このことより、CTXに存在する6個のヒスチジン残基が機能的に重要であることが示唆された。CTXの構造と機能;CTXの前駆体毒素の精製に成功した。この前駆体毒素には活性が認められず、また、前述のオリゴマー形成能をもたない。この前駆体毒素と活性型毒素とのトリプトファン蛍光スペクトルの比較の結果、前駆体が活性型へ変化することにより、最大エミッション波長が335nmから342nmへ移行するとともにエミッション強度が減少することが明らかになった。これは、三次構造の変化、つまり、分子表面がより親水性の環境に変化し、トリプトファン残基がより分子内にフォールディングされることが示唆された。

The activity of CTX was sequenced, and the membrane of CTX was confirmed by Elisa. Red blood cells (RBC) were determined by using the time temperature of pH assay and hemolytic activity assay, which were used to determine the activity of hemolysis. Please make sure that the polynucleated ball is covered by the polynucleus membrane. The cell breakage activity, the cell collapse activity, the cell collapse activity, the cell In addition, the internal device is closed in the cell membrane of the device (CF). The CF is out of the CTX-dependent network, and the cell membrane is displayed in the cell. The cell collapse activity of CTX was lost in the first place. There are six important financial indicators for the monitoring of residual energy in both the CTX and the Beijing Municipal Government. The mechanism of CTX was successfully established, and the protoxins of CTX were successfully tested. The activity of somatic toxins in front of the body confirms that the formation of the above-mentioned toxins can not be detected. The results of photospecific comparison of protoxins, active toxins, bioactive toxins, progenitors, active toxins, 335nm, 342nm, peak, phase, peak, temperature, temperature, temperature The chemical reaction, the three-time chemical reaction, the molecular surface modification, the water-based environmental degradation, and the intramolecular instillation of the residues in the molecule.