糖尿病性腎症の発症機構における系球体内皮細胞とメサンギウム細胞の相互作用

糖尿病肾病发病机制中球形内皮细胞与系膜细胞的相互作用

• 批准号: 05770767
• 负责人: 古家 大祐
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770767/
• 关键词: 糖尿病性腎症; メサンギウム細胞; 内皮細胞; 内皮由来弛緩因子; ブラジキニン; 可溶性グアニル酸シクラーゼ; cGMP

私共は、高糖濃度条件培養メサンギウム細胞において、心房性ナトリウム利尿ペプチド応答性の増加およびアンジオテンシンII応答性の低下が認められることを報告し、これら機能異常が糖尿病性腎症の発症に関与している可能性を示した。しかし、生体においては他の内皮あるいは上皮細胞と共存しており、それらの相互作用について検討する必要がある。そこで本研究は、メサンギウム細胞(rat mesangial cell,MC)を正常(5.6mM glucose)あるいは高糖濃度(27.8mM glucose)条件下で5日間培養後、正常糖蜜度で培養した牛大動脈内皮細胞(bovine aortic endothelial cell,BAEC)とco-incubation系に置き、内皮質細胞側をブラジキニンにより刺激した後、メサンギウム細胞内cGMP産生を測定することにより、高密濃度条件下における内皮細胞のEDRF産生生能およびメサンギウム細胞のEDRF応答性の変異を検討した。ついで、メサンギウム細胞のEDRF応答性をさらに詳細に検討するため、高密濃度条件下で培養したメサンギウム細胞を用い、ニトロプルシドナトリウム塩(sodiumu nitroprussede,SNP)刺激時の可溶性グアニル酸シクラーゼ(SGC)活性を測定した。高密濃度(27.8mM)条件下で培養したMCと正常糖濃度(5.6mM)条件下で培養したBAECをco-incubationし、ブラジキニン(1muM,10分)で刺激時のMC内cGMP含量は、68.2±27.7pmol/mg proteinであり、正常糖濃度(5.6mM)条件での値67.6±10.1pmo1/mg proteinとの差を認めなかった。SNP刺激にて、正常糖濃度(5.6mM)条件下でSGC活性は約2倍に増加した。また、糖濃度16.7mMおよび27.8mMにおいても、SNP刺激時のSGC活性は約2倍であり、正常糖濃度条件下と差を認めなかった。以上の結果より、メサンギウム細胞におけるEDRF-SGG-cGMP経路が糖尿病性腎症に認められる腎血行動態の異常に関与している可能性は否定的であると考えられた。ただし、今回の検討では、メサンギウム細胞のみを高糖条件下にて培養しており、高糖濃度条件の内皮細胞からのEDRF産性あるいは分解に関する変化については今後の課題である。

In this paper, we report the possibility of the development of diabetic kidney disease due to the increase of diuretic activity and decrease of atrial response in cultured cells with high glucose concentration. In addition, it is necessary to study the interaction between epithelial cells and living organisms.そこで本研究は、メサンギウム细胞(rat mesangial cell)(5.6mM glucose) HIGH Glucose Concentration (27.8mM glucose) for 5 days, normal molasses for 5 days (Bovine aortic endothelial cell (BAEC) co-incubation is a method for measuring intracellular cGMP production in endothelial cells under high concentrations of EDRF production and EDRF responsiveness of endothelial cells after stimulation of endothelial cells and endocortical cells. The EDRF response of these cells was studied in detail. The EDRF response of these cells was measured when they were cultured at high concentrations. Soluble acid secretion (SGC) activity was measured when stimulated by sodium nitroprussede (SNP). Under high concentration (27.8 mM), the cGMP content in MC was 68.2± 27.7 pmol/mg protein, while under normal glucose concentration (5.6 mM), the cGMP content in MC was 67.6± 10.1 pmol/mg protein. SGC activity increased about 2-fold under SNP stimulation and normal glucose concentration (5.6 mM). SGC activity was about 2-fold higher when SNP was stimulated at 16.7 mM and lower at normal sugar concentration. The above results indicate that it is possible that the EDRF-SGG-cGMP pathway in diabetic kidney cells is related to abnormalities in renal blood flow in diabetic kidney disease. In this paper, we discuss how to culture endothelial cells under high glucose conditions and how to decompose endothelial cells under high glucose conditions.

项目成果

古家大祐 他: "培養ラットメサンギウム細胞におけるFocal Adhesion Kinaseの燐酸化に及ぼすエンドセリンの効果" 第36回日本腎臓学総会抄録衆. 316 (1993)

Daisuke Furuya 等人：“内皮素对培养的大鼠系膜细胞粘着斑激酶磷酸化的影响”第 36 届日本肾病学会会议摘要 316（1993 年）。

D.KOYA et.al: "Endothelin enhances tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase(FAK)by protein kinase C-dependent pathway in cultured mesengial cells" Journal of The American Society of Nephrology. 4. 491- (1993)

D.KOYA 等人：“内皮素在培养的系膜细胞中通过蛋白激酶 C 依赖性途径增强粘着斑激酶 (FAK) 的酪氨酸磷酸化”美国肾病学会杂志。