インスリンシグナル伝達におけるチロシン蛋白脱燐酸化酵素の意義

酪氨酸蛋白磷酸酶在胰岛素信号转导中的意义

• 批准号: 05770766
• 负责人: 前川 聡
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770766/
• 关键词: インスリン受容体; チロシンホスファターゼ; Insulin Receptor Substrate 1; PTP1C; SH-PTP2; Src homology 2

最近、インスリン受容体の内因性基質の一つであるpp180がInsulin receptor substrate-1(IRS1)として、cloningされ(Nature 352,73,1991)、その構造中に、Src homology2(SH2)regionと結合するYMXM motifが存在することが明かとなった。PDGFやEGF受容体のように、インスリン受容体に於ても、IRS-1を介してSH2 regionを有する分子の相互作用が存在することが明かにされた。インスリン受容体はチロシン特異的キナーゼであり、そのキナーゼを介するシグナル伝達の調節機構には、逆反応であるProtein Tyrosine Phosphatase(PTPase)が関与するものと考えられている。近年、SH2 regionを有するPTPase(PTP1C)がBreast carcinoma cell lineからcloningされ、その分子内のSH2regionとEGF受容体との結合が報告された(Nature 352,736,1991)。我々は、IM9細胞やHepG2細胞に於て、同様なmRNAが発現しているかをPT-PCR法を用いて検討し有意な発現を認めた。これらの細胞RNAよりPTP1CcDNAをPCR法を用いて合成し、subcloning後、塩基配列を確認し、pGEX vectorを用いて融合蛋白として発現させ、同様に作成したIRS-1のYMXM motifを含む蛋白やインスリン受容体蛋白との相互作用を検討した。更に、最近、PTP1Cよりも多くの臓器で発現が確認されているSH2 regionをもつPTPaseの一つであるSH-PTP2に注目し、同様な検討を行ったところ、SH-PTP2が、in vitroでインスリン受容体キナーゼによりリン酸化されること、更に、インスリン受容体Cの末端に結合することを見いだした(Maegawa et al.Biochem Biophys Res Commun,194,208,1993)。更に、このSH-PTP2は、IRS-1にも結合することも見いだした(Ugi et al.FEBS Letters,in press)。一方、PTP1Cは、インスリン受容体によりリン酸化も受けず、結合も認められなかった。これらの燐酸化やインスリン受容体、IRS-1との結合の生理的意義は現在不明であり、これらSH2領域をもつPTPaseのインスリンシグナル伝達機構における役割の解明は、今後の重要な課題である。

Recently, pp180, Insulin receptor substrate-1(IRS1) and cloning (Nature 352, 73, 1991) have been identified as intrinsic substrates of insulin receptors. PDGF and EGF receptors interact with each other via IRS-1 and SH-2 regions. Protein Tyrosine Phosphatase(PTase) is a protein receptor that regulates the expression of protein tyrosine in a specific manner. In recent years, PTase (PTP1C) has been reported to bind to Breast carcinoma cell line and EGF receptor within the molecule (Nature 352, 736, 1991). The expression of mRNA in HepG2 cells and IM9 cells was detected by PT-PCR. PTP-1C cDNA was synthesized by PCR, subcloned, sequenced, pGEX vector was generated, and IRS-1 YMXM motif was constructed to investigate the interaction between PTP-1C and pGEX receptor proteins. More recently, PTP1C has been identified as a receptor for SH2 region, SH-PTP2 region, SH-PTP-2 region, SH-P- In addition, SH-PTP2 and IRS-1 are combined (Ugi et al. FEBS Letters,in press). A party, PTP1C, a party, a party The physiological significance of IRS-1 binding to phosphorylated receptors is unclear, and the mechanism of IRS-1 binding in SH2 domain is unclear.

项目成果

Maegawa,H.et al.: "Co-expression of mutant and normal human insulin receptors in COS-7 cells" Biochimica et Biophysica Acta. 1216. 425-430 (1993)

Maekawa,H.et al.：“COS-7 细胞中突变型和正常人胰岛素受体的共表达”Biochimica et Biophysicala Acta。

Ugi,S.et al.: "Src homology 2 domains of Protein Tyrosine Phoschatase are Associated in vitro with Both Insulin Receptor and Insulin Receptor Substrate-1 via different phosphotyrosine motifs" FEBS lett.(in press).

Ugi,S.等人：“蛋白质酪氨酸磷酸酶的 Src 同源 2 结构域在体外通过不同的磷酸酪氨酸基序与胰岛素受体和胰岛素受体底物 1 相关” FEBS lett.（出版中）。

Haruta,T. et al.: "Ala^<1048>→Asp mutation in the kinase domain of insulin receptor causes defective kinase activity and insulin resistance." Diabetes. 42. 1837-1844 (1993)

Haruta, T. 等人：“胰岛素受体激酶结构域中的 Ala^<1048>→Asp 突变会导致激酶活性缺陷和胰岛素抵抗。”42. 1837-1844 (1993)

Maegawa,H.et al.: "Src homology 2 domains of protein tyrosine phosphatase are phosphorylated by insulin receptor kinase and bind to the COOH terminus of insulin recceptors in vitro" Biochem Biophys Res Commun.194. 208-214 (1993)

Maekawa,H.et al.：“蛋白质酪氨酸磷酸酶的 Src 同源 2 结构域被胰岛素受体激酶磷酸化，并在体外与胰岛素受体的 COOH 末端结合”Biochem Biophys Res Commun.194。

Maegawa,H.et al.: "Pioglitazone ameliorates high glucose induced desensietization of insulm receptor kinase in Rat 1 fibroblasts in culture" Biochem Biophys Res Commun. 197. 1078-1082 (1993)

Maekawa,H.et al.：“吡格列酮改善培养物中大鼠 1 成纤维细胞中高葡萄糖诱导的胰岛素受体激酶脱敏”Biochem Biophys Res Commun。