破骨細胞性骨吸収におけるコンドロイチン硫酸プロテオグリカンの検討

硫酸软骨素蛋白聚糖在破骨细胞骨吸收中的研究

• 批准号: 05771652
• 负责人: 村橋 慶宣
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771652/
• 关键词: 破骨細胞性骨吸収; ウエスタンブロッティング; コンドロイチン硫酸プロテオグリカ

本実験は歯肉溝滲出液中に検出されるコンドロイチン硫酸プロテオグリカン(CS-PG)が歯周炎時に増加すること、さらにCS-PGは歯槽骨の主要グリコサミノグリカン成分であることから、歯槽骨吸収マーカーになりうる可能性が示唆されている。しかし、骨吸収時、骨CS-PGが遊離するかについては不明である。本研究は、破骨細胞性骨吸収時に骨CS-PGが遊離するか検討した。新生ウサギより得た単離破骨細胞を、ウシ大腿骨骨片上で培養し、遊離CS-PGをモノクローナル抗体を用いELISA法にて検討した結果、培養液中にCS-PGは存在するものの、絶対量が少ないため定量するまでには到らなかった。また、吸収萵を抗コラーゲン抗体で染色し吸収萵を可視化し定量する実験では、吸収萵が染色され吸収萵面積の定量化も可能であったが、ELISA法による遊離CS-PGの定量ができず、吸収萵面積と遊離CS-PG量間の比較検討はできなかった。しかし、ELISA法と同じモノクローナル抗体を使用し、ウエスタンブロッティング法にて培養液中CS-PGを定性した結果、コンドロイチン4硫酸プロテオグリカン(C4S-PG)が5kd、20kdおよび35kd付近に認められた。一方、コントロール(培養液のみ、破骨細胞のみ培養した培養液、骨のみ培養した培養液)では全て5kdと35kdにC4S-PGが検出された。また、ウシ大腿骨のCS-PGを抽出後、ウエスタンブロッティングした結果、C4S-PGが14kd、20kd、65kdおよび10kd付近に認められた。以上の結果により、単離破骨細胞を骨片上で培養した培養液中の20kd付近に認められたC4S-PGは、骨吸収時に骨により遊離するかあるいは破骨細胞により産生されたものであることが示され、歯肉溝滲出液中のC4S-PGが歯槽骨破壊のマーカーになりうる可能性が示唆された。

This is a sulfuric acid sulfuric acid solution in the exudate of the meat groove.テオグリカン(CS-PG)が歯久 inflammation时に姗加すること、さらにCS-PG's main ingredientsから、The possibility of trough bone resorption is not the same. When the bone is resorbed, the bone CS-PG is free and the bone is not clear. In this study, it was determined that CS-PG was free from bone during osteoclastic bone resorption. Isolated osteoclasts were obtained from newly born ウサギより, cultured on ウシ femoral bone fragments, and free CS-PG をモノクローナル antibodies were used in ELIS The result of method A is the presence of CS-PG in the culture medium, and the absolute amount of CS-PG is quantitatively determined.また、Absorption lettuce staining with anti-コラーゲン antibodyでAbsorption lettuce visualizationしquantificationする実験では、Absorption lettuce stainingされquantification of the absorption lettuce area is possible Quantification of free CS-PG using ELISA method, comparison between absorption area and amount of free CS-PG. The ELISA method is the same as the ELISA antibody method, and the ELISA method is the same as the CS-PG in the culture medium. The results, コンドロイチン4 sulfate プロテオグリカン (C4S-PG) が5kd, 20kd および35kd pay close to められた. One party, コントロール (culture medium, osteoclast culture medium, bone culture medium), 5kd, 35kd, C4S-PG, 検出された.また, ウシ thigh bone CS-PGを extracted, ウエスタンブロッティングした results, C4S-PGが14kd, 20kd, 65kdおよび10kd pay close to the recognitionめられた. The above results show that isolated osteoclasts were cultured on bone slices, 20kd close to C4S-PG was detected in the culture medium, and bone was free during bone resorption. Osteoclasts are produced by osteoclasts and are produced in the exudate of the meat groove.のC4S-PG が歯 groove bone breaking 壊 のマーカーになりうるpossibility がshows instigation された.