植物細胞における分裂予定位置への細胞質の集積機構の解析

植物细胞计划分裂位点细胞质积累机制分析

• 批准号: 05740495
• 负责人: 村田 隆
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05740495/
• 关键词: アクチン; アミプロホスメチル; 原糸体; 細胞質; 細胞質分裂; 前期前微小管束; ホウライシダ; 微小管

従来の研究結果より、ホウライシダ原糸体細胞を分裂開始直前に遠心して細胞質内質を分裂予定位置から除去すると、遠心後に、本来の分裂予定位置に細胞質が再集積することが明らかになっている。この現象を解析すれば、細胞分裂の位置情報の実体をつかむ手がかりが得られると思われる。そこで、本年度は、細胞骨格系の染色を行い、細胞骨格系の阻害剤の効果を調べ、さらに、細胞質の再集積した領域の微細構造を調べた。まず、微小管、F-アクチンの蛍光染色を行った。抗チューブリン抗体とロ-ダミンファロイジンを用いた二重染色法を確立し、観察したところ、細胞質の集積は前期前微小管束(PPB)上で起こり、集積した細胞質はF-アクチンを多量に含むことがわかった。細胞周期の様々な時期に遠心を行ったところ、PPBの形成前に遠心した細胞では集積は起こらなかったので、この細胞質の集積はPPBの形成に依存していることが推測された。一方、集積の起こった細胞を経時的に観察したところ、集積した細胞質は遠心により移動した核の位置での細胞質分裂終了後に分散した。微小管の阻害剤であるアミプロホスメチルを細胞質の集積前に与えると集積の起こる頻度は低下したが、すでに集積の起こった時期に与えると、遠心により移動した核の位置での細胞質分裂は阻害され、細胞質集積の持続時間は長くなった。この結果は、細胞質の集積が細胞質分裂の制御と密接な関係にあることを示唆する。電子顕微鏡により集積領域の微細構造を観察した。集積領域には多量のミトコンドリアが観察されたが、蛍光観察でみられたアクチンフィラメントは確認できなかった。

先前的研究结果表明，当分裂开始前的原始晶状体细胞离心并从预期位置上去除细胞质子宫内膜时，离心后的原定位置的细胞质会重新组合。通过分析这种现象，我们可以提供线索来掌握细胞分裂位置信息的真实性质。因此，今年，我们对细胞骨架系统进行了染色，以研究细胞骨架系统抑制剂的作用，并进一步研究了细胞质重新组装区域的微观结构。首先，对微管和F-肌动蛋白进行荧光染色。建立并观察了使用抗微管蛋白抗体和杜鹃胺的双重染色方法，发现细胞质积累发生在先知前微管（PPB）上，并且积累的细胞质含有大量的F-actin。在细胞周期中的不同时间进行离心，并且在PPB形成之前离心的细胞中没有发生积累，因此可以推测这种细胞质积累取决于PPB的形成。另一方面，当观察到积累的细胞随着时间的流逝，累积的细胞质被分散在细胞因子在通过离心迁移的细胞核位置的位置上分散。当微管抑制剂在细胞质积累之前给予氨基氨基甲基，当积累频率发生频率时，但是当它在已经发生的时候给出时，当它在已经发生的时候给出时，通过偏心偏移的位置抑制细胞因子，并且细胞质积累的持续时间增加。该结果表明细胞质积累与细胞因子的调节密切相关。使用电子显微镜观察到集成区域的显微结构。在累积区域观察到了大量的线粒体，但尚未确认荧光中观察到的肌动蛋白丝。