前期前微小管束の形成に依存して起こる細胞質の集積機能の解析

细胞质积累功能依赖于前期微管束形成的分析

• 批准号: 07740635
• 负责人: 村田 隆
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740635/
• 关键词: 細胞質分裂; 前期前微小管束; ホウライシダ; ゴルジ体; 微小管

前期前微小管束(PPB)は、高等植物において、分裂予定位置の細胞表層に形成される微小管の束であり、細胞板を正しい位置に導くことに関与していると考えられている。PPBの機能の一つの可能性として、分裂予定位置の細胞膜へ分泌小胞を導く可能性が古くから考えられているが、証明は全くなされていない。ホウライシダ原糸体細胞において、分裂直前に細胞を遠心し、核と細胞質を分裂予定位置から移動すると、すでに形成されていたPPBの形成場所に細胞質が集積することは報告した(村田、和田 1994)。PPBによって、ゴルジ体由来の分泌小胞がPPBの存在する細胞膜に融合した結果、細胞表層が細胞質を集積させる能力を獲得する可能性を考え、今年度はこの可能性の検討を行った。ホウライシダ原糸体を細胞板形成開始の約2時間前にゴルジ体の破壊剤であるブレフェルジンA(BFA: 50μg/ml)で処理すると、細胞板形成が阻害され、多核の細胞が誘導された。細胞板は分泌小胞の融合により形成されることから、50μg/mlのBFAは分泌小胞の形成を阻害すると考えられた。同様のBFA処理をPPB形成途中に行い、薬剤存在下で2.5 時間培養した後に細胞を遠心して細胞質の集積に対する影響を調べた。遠心直前に細胞を固定し、電子顕微鏡によりゴルジ体を観察したところ、ゴルジ体の数は減少し、残ったゴルジ体は極端に変形していた。一方、PPBに異常は見られなかった。遠心後の細胞質の集積はBFAによって阻害された。しかしながら、BFAを処理した細胞においては細胞周期の遅れと非同調化が見られ、BFAによる細胞質の集積阻害がゴルジ体の破壊を介して起こったのか証明するには至っていない。

预言前微管（PPB）是在其预期位置在细胞表面的高植物中形成的微管束，被认为与将细胞板引导到其正确位置有关。 PPB的一个潜在功能是，它可以将分泌囊泡带到其预期的划分位置到细胞膜，但尚未提供证据。我们报道说，在原始细胞中，当细胞在分裂之前离心，细胞核和细胞质从预期的分裂位置移动时，细胞质会在已经形成的PPB形成位置积聚（Murata，Wada，1994年）。考虑到由于细胞表面层从高尔基体融合到PPB所在的细胞膜而导致的细胞表面层可以获得积累细胞质的能力，因此今年对这种可能性进行了检查。用Brefeldin A（BFA：50μg/ml）（一种高尔基剂破坏剂）处理原始脊柱，大约在开始形成细胞板的前2小时，抑制细胞板的形成和诱导的多核细胞。由于细胞板是通过分泌囊泡融合而形成的，因此人们认为50μg/ml bfa抑制了分泌囊泡的形成。在PPB的形成过程中，进行了类似的BFA处理，并在存在药物2.5小时的情况下培养后，将细胞离心以研究对细胞质积累的影响。在离心之前，固定细胞，并使用电子显微镜观察到高尔基体。高尔基体的数量减少了，其余的高尔基体的变形极高。另一方面，在PPB中未观察到异常。 BFA抑制离心后的细胞质积累。然而，在用BFA处理的细胞中观察到了细胞周期延迟和分析，无法证明是否通过破坏高尔基体来抑制BFA对细胞质积累的抑制。