リゾホスホリパーゼ/アシルトランスフェラーゼの精製と細胞内シグナル伝達への関与

溶血磷脂酶/酰基转移酶的纯化及其在细胞内信号转导中的作用

• 批准号: 05857019
• 负责人: 杉本 博之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857019/
• 关键词: リゾホスホリパーゼ・トランスアシラーゼ; リゾホスファチジルコリン; ホスファチジン酸; リゾホスファチジン酸; ホスホリパーゼA2; ホスホリパーゼD; プロティンキナーゼZ

我々は、ラット肝臓可溶性画分より、種々のカラムを使用し、23Kのリゾホスホリパーゼ及び60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼをそれぞれ510および20万倍に精製し、すでに均一な標品を得た。両酵素ともホスファチジン酸により活性が阻害されることが判明したが、60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼはより著明に阻害され、Kiは10uMであった。また、23Kのリゾホスホリパーゼの抗体を得たところ酵素は細胞質にのみ存在することが確認され、60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼとは交差しなかった。ミクロゾーム画分にもリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼ活性が存在し、この活性もホスファチジン酸により著明に阻害された。また、23Kのリゾホスホリパーゼの抗体を使用し、本酵素のcDNAのクローニングが終了した。現在このcDNAをシークエンス中である。今後、60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼの抗体も作成し、cDNAのクローニングより酵素の構造を明らかにし、両酵素の調節機構の詳細を解析しようとするものである。あわせて、60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼの抗体を使用し、その細胞内分布を明らかにしたい。

We have prepared a soluble sample of 510 to 200,000 times more refined and uniform standard at 23K and 60K. The enzyme activity was detected at 60K. The enzyme activity was detected at 10uM. 23K The activity of the enzyme was detected by the enzyme and the enzyme was detected by the enzyme. 23K protein was used to detect the expression of the cDNA of this enzyme. Now in the cDNA. In the future, 60K antibody production, cDNA enzyme structure and enzyme regulation mechanism will be analyzed in detail. The use and intracellular distribution of antibodies at 60K were investigated.