全身性硬化症におけるトポイソメラーゼIに対する自己免疫応答の解明-クラスIIHLAと抗原提示細胞の役割-

阐明系统性硬化症中拓扑异构酶 I 的自身免疫反应 - II 类 HLA 和抗原呈递细胞的作用 -

• 批准号: 05857057
• 负责人: 桑名 正隆
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857057/
• 关键词: 全身性硬化症(強皮症); 自己抗体; DNAトポイソメラーゼI; T細胞; エピトープ; 主要組織適応抗原; HLA

本研究ではT細胞の主要組織適応抗原(MHC)を介した抗原組織の段階での自己抗体(抗DNAトポイソメラーゼI抗体:抗topo I抗体)産生の役割を明らかにするため、精製したtopo Iを用いて全身性硬化症(強皮症)患者および健常人末梢血単核球(PBMC)を刺激し、その反応をリンパ球の増殖により判定した。cDNA断片より発現させることにより得られた、5つのoverlapしてtopo Iの全塩基配列をコードする融合蛋白を抗原として用いた。抗topo I抗体陽性患者のPBMCはtopo Iにより著名な増殖反応を示し(stimulation index 5〜25)、モノクローナル抗体による抑制試験により反応を示したのはCD4^+T細胞が主であった。またこの反応はHLA‐DR抗原により拘束されていた。ほとんどの抗topo I抗体陰性強皮症患者と健常人のPBMCはtopo Iに反応しなかったが、抗topo I抗体と関連するHLA‐DR遺伝子(DRB1^*1502またはDRB1^*1104)をもった例では軽度の反応を示した(stimulation index3‐6)。5つのtopo I融合蛋白を用いたリンパ球増殖試験では、topo I分子上に少なくとも3つの独立したT細胞エピトープが存在し、全例が認識するT細胞エピトープは、以前申請者が明らかにした主要なB細胞エピトープとは異なった。またT細胞エピトープの分布とHLA‐DRおよびDQ遺伝子が密接に関連していた。これらの成績は、強皮症患者における抗topo I抗体はtopo I分子そのものの抗原刺激によって産生され、その産生はT細胞とMHCにより制御されていることを示唆する。現在抗topo I抗体陽性強皮症患者のPBMCより、topo Iと反応するT細胞を分離することに成功し,さらに詳細な分析を行っている。

In this study, the main tissue-adaptive antigen (MHC) of T cells was introduced and the antigen tissue stage was autoantibodies (anti-DNA antibodies: anti-topo I Antibodies) Produced by の丒开らかにするため、purified したためI used the method of stimulating and stimulating the peripheral blood cells (PBMC) of patients with systemic sclerosis (hypodermia) and judging the proliferation of PBMC. cDNA fragment より発appears させることにより得られた、5つのoverlapしてtopo I'm a full-base ligated fusion protein and an antigen. Anti-topo I antibody-positive patients' PBMC's topo I's famous stimulation index (stimulation index 5 ~ 25), the inhibitory test of the モノクローナル antibody によるによりanti-anti-CD4^+T cells was carried out.またこのanti-HLA-DR antigen により恕れていた.ほとんどのanti-topo I antibody-negative thyrodermatosis patient and normal person PBMCはtopo Iにanti-topo しなかったが, anti-topo I antibody is related to the HLA-DR gene (DRB1^*1502, DRB1^*1104), and the anti-reverse reaction (stimulation index 3-6). 5つのtopo I fusion protein, using いたリンパ ball propagation test, topo I have few independent T cells on the molecule and know all the examples. Cell エピトープは, previous applicant が明らかにしたmain なB cell エピトープとはdifferent なった. The distribution of T cells and the close connection between HLA-DR and DQ are closely related.これらの成は、A strong skin disease patient におけるanti-topo I antibody はtopo The I molecule antigen stimulates the production of T cells, the production of T cells, and the control of MHC cells. Currently, the isolation and isolation of topo I antibody-positive epithelial cells from PBMC and topo I-reactive T cells have been successfully performed, and detailed analysis has been carried out.

项目成果

M.Kuwana: "Autoantigenic epitopes on DNA topoisomerase I:Clinical and immunogenic association systemic sclerosis." Arthrits Rheum.36. 1406-1413 (1993)

M.Kuwana：“DNA 拓扑异构酶 I 上的自身抗原表位：系统性硬化症的临床和免疫原性关联。”

M.Kuwana: "The HLA‐DR and DQ genes control the antoimmnre response to DNA topoisomerase I in systemic sclerosis(sclerocterma)" J.Clin.Invest.92. 1296-1301 (1993)

M. Kuwana：“HLA-DR 和 DQ 基因控制系统性硬化症（硬皮病）中 DNA 拓扑异构酶 I 的抗免疫反应”J.Clin.Invest.92 (1993)。